优化苯酚硫酸法测定金线莲中多糖含量
2019-09-13张松柏
张松柏,陈 磊,许 文,张 勋,徐 伟,林 羽
(福建中医药大学药学院,福建 福州350122)
金线莲(Anoectochilusroburghii(Wal1.) Lindl),又名金线兰、金蚕、乌人参、金线入骨消等,是一种多年生兰科草本植物[1],主产地为福建。文献报道多糖类、黄酮类、生物碱类、氨基酸类等是金线莲主要化学成分[2]。其中金线莲多糖是其主要药理活性物质,具有降血糖、抗氧化、抗肝损伤、增强免疫功能、抗肿瘤等药用功效[3],因此测定金线莲多糖可以为金线莲质量标准提供依据。苯酚硫酸法是测定多糖含量的经典方法,但是其对显色条件要求严格,操作要求高[4]。本文旨在优化苯酚硫酸法,提高金线莲多糖含量测定的灵敏度和可操作性。
1 材 料
1.1 仪器 UV-3200紫外分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);AR224CN电子天平(美国奥豪斯仪器常州有限公司);SC-04低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司);KQ-500DE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);HWS-12型电热恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。
1.2 试剂 D-无水葡萄糖(中国食品药品质量检定研究院,批号:110833-201506);硫酸(广东西陇化工有限公司,批号:180922);苯酚(中国医药集团上海化学试剂公司,批号:P815401);超纯水(实验室制备)。
1.3 药材 不同产地金线莲样品8批,经福建中医药大学药学院黄泽豪副教授鉴定为兰科开唇兰属的金线莲(Anoectochilusroburghii(Wal1.) Lindl),样品信息表见表1。
2 方 法
2.1 供试品溶液的制备 精密称取干燥金线莲全草粉末(60℃烘干、过60目筛)0.5 g,置于锥形瓶中;以料液比1∶20加水,60℃超声提取 30 min,3 600 r/min离心15 min,取上清液置于锥形瓶中,重复3次;合并上清液,旋蒸至约20 mL,加入Sevage试剂,离心,重复3次合并上清液;……
