APP下载

西花蓟马几丁质合成酶UAP基因克隆及功能分析

2019-09-10陆承聪李恒张祥琴王谅陈艺欣田厚军林硕张洁陈勇魏辉

福建农业学报 2019年12期

陆承聪 李恒 张祥琴 王谅 陈艺欣 田厚军 林硕 张洁 陈勇 魏辉

摘要:[目的]阐明几丁质合成通路中的关键基因UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(UDPN-acetylglucosaminepyrophosphorylases,UAP)对西花蓟马Frankliniella occidentalis生长发育的影响。[方法]基于西花蓟马转录组数据,克隆验证了UAP基因的开放阅读框(openReadingFrame,ORF)全长序列,命名为FoccUAP。利用RT-qPCR方法分析FoccUAP在各个组织和不同龄期的表达情况。最后通过向西花蓟马蜕皮24h的2龄若虫显微注射dsUAP,检测沉默效率,观察其对西花蓟马生长发育的影響。[结果]FoccUAP基因开放阅读框全长1545bp,编码514个氨基酸,预测蛋白分子量为56.738kDa,具有Glyoo-tmnf-GTA-typcSuperfamily家族的保守结构域,与等翅目、蜚蠊目、直翅目和半翅目昆虫的UAP基因亲缘关系较近。FoccUAP基因在西花蓟马各个组织都有表达,在头部和腹部相对表达量最高,触角、胸部和足相对表达量较低。该基因在虫体生长发育的各个阶段均有表达,其中2龄幼虫、蛹以及羽化后24、48、168、240h的成虫表达量分别是1龄幼虫的1.30、2.50、1.56、2.0、2.43和2.56倍。RNAi结果表明,注射dsUAP的西花蓟马羽化率(36.3%)和注射后120h的存活率(5.0%)均显著低于dsGFP对照组,且注射dsUAP的西花蓟马成虫出现翅膀发育不完整、胸腹部皱缩不规则等畸形现象。[结论]FoccUAP基因对西花蓟马生长发育具有重要的作用。

关键词:西花蓟马;UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶;几丁质合成;RNAi

中图分类号:S435文献标志码:A 文章编号:1008-0384(2019)12-1419-07

0 引言

[研究意义]西花蓟马Frankliniella occidentalis,属于缨翅目Thysanoptera,蓟马科Thripidae,是全球性的重要害虫之一,主要通过直接取食以及间接传播病毒病对250多种农作物、花卉、蔬菜和树木造成危害。2003年6月在我国大陆首次发现该虫,2004年后在北京和云南等地造成严重危害,是一种危险性入侵生物。……

登录APP查看全文