杨焕治 熊芳琪 杨岚 杨中扬 陈咸吉 聂现辉 彭国平

摘 要：目的：探究不同组分羧甲基茯苓多糖（CMP）对HepG2细胞增殖的影响。方法：在不同提取碱浓度和碱处理时间下，采用二次加碱法制备不同组分CMP。利用硫酸-蒽酮法、滴定法和CCK-8法对CMP的含量、取代度和HepG2细胞增殖检测。结果：获得7个组分CMP，含量为85%～90 %，取代度为0.65～0.80。不同浓度CMP培养HepG2细胞24 h下，CMP 750 μg/mL抑制细胞增殖效果最好，其中CMP3抑制率最高达50.035 %。CMP 750 μg/mL培养HepG2细胞24、48、72 h，在48 h下抑制效果最好，其中CMP3抑制效果最高达到76.05 %。在72、48、24 h 下CMP3培养HepG2细胞的IC50分别为26.34、34.06、763.64 μg/mL。结论：CMP能有效抑制HepG2肿瘤细胞的增殖，其中CMP3是7个CMP组分中抑制效果最好的，这与CMP3的含量、浓度呈正相关性，48 h为CMP最适抑制时间。

关键词：不同组分;羧甲基茯苓多糖;HepG2;细胞增殖

茯苓多糖羧甲基化可增加茯苓多糖支链的负电性、水溶性，改善生物功能，提高抗癌活性[1-2]。HepG2是人肝胚细胞瘤细胞系，其保留了较完整的代谢酶，是良好的肝癌发生机制研究材料[3]。CCK-8法是抗肿瘤药物筛选、肿瘤药敏、細胞增殖、细胞毒性试验的理想方法，其操作简便、灵敏度高、可重复性高[4]。目前，大量研究证实，天然提取物能作用于细胞凋亡信号途径中一些重要凋亡因子，诱导细胞凋亡，抑制肿瘤增殖[5]。迄今全球肝癌的发病率及病死率高居不下，同时肝癌的发生发展机制并未明确[6]。本实验探究不同CMP组分对HepG2细胞增殖影响，为CMP抑制HepG2细胞增殖提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

白茯苓块，湖南省靖州产;HepG2人肝癌细胞系，采购中科院上海细胞库;无水乙醇（CHO）、氢氧化……