冯莉 王晓华 白瑞芳 周燕 董弘 冀小平

荧光原位杂交技术(flourescence in situ hybridization，FISH)是将分子生物探针与染色体特定位点结合来检测染色体异常的一类技术。在上世纪80年代中期，D’Alton等[1]应用FISH技术检测到间期细胞核中数目异常的染色体。理论上FISH技术可以检测所有染色体数目异常，由于13、18、21号以及X、Y染色体发生非整倍体畸变的频率较高，占所有染色体病的65%～80%，因此设计这五条染色体的探针将其应用到产前诊断中可以快速检测常见染色体非整倍体畸变，易于普及，并具有一定临床应用价值。

对象与方法

1. 研究对象：本研究对象来源于2015年1月—2017年6月期间在内蒙古自治区妇幼保健院进行产前诊断的孕妇。孕妇年龄分布为18～46岁，平均年龄(33.0±5.8)岁；孕周大多集中在22周左右，其中最小孕周为17周+1天，最大33周。

2 .实验方法：采集筛查高风险、超声提示胎儿异常以及高龄孕妇的羊水199例，进行核型分析及FISH检测。

(1)染色体核型分析实验方法：离心收获羊水细胞，加入5 ml培养液，分装入两个培养瓶中，在37℃温箱中培养，培养7～8天后换液。在第10～12天，镜检细胞群落长势良好，则加入秋水仙素，继续培养2～4 h；处理后取出培养瓶，加入EDTA胰酶消化。收集培养后羊水细胞进行低渗、固定再处理、滴片、烤片后进行染色体镜检。

(2)FISH检测实验方法：玻片样本处理，探针杂交，洗片，DAPI染色。阅片：荧光显微镜下随机计数50个强信号且无重叠的杂交细胞。结果判读：镜下阅片若大于90%的核型显示非整倍体信号则判断为异常。若10%～60%的核型显示非整倍体信号则判断为嵌合体。……