武瑞霞 高涛

[摘要]目的：探讨氦氖激光治疗对大疱性类天疱疮皮损CXCR5、ICOS的影响及与疗效的关系。方法：选取2012年1月-2018年8月于笔者医院诊治的84例大疱性类天疱疮患者为研究对象，采用随机数字法分为对照组和实验组，每组42例。两组均给予糖皮质激素系统治疗，实验组在此基础上给予氦氖激光治疗，对比两组治疗前后泡液中CXCR5、ICOS表达水平及临床疗效。结果：治疗前两组CXCR5、ICOS含量比较差异无统计学意义（P>0.05）;与治疗前比较，治疗后2周、4周和6周疱液CXCR5、ICOS含量明显降低，且实验组明显低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较，实验组无新疱长出时间、皮损面基本无渗出时间和愈合时间均显著缩短，总有效率显著升高，差异均具有统计学意义（P<0.05）。治疗有效者治疗前疱液中CXCR5和ICOS含量显著低于无效者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：糖皮质激素联合氦氖激光治疗大疱性类天疱疮可有效提高疗效，这可能与疱液中CXCR5和ICOS表达水平相关。

[关键词]大疱性类天疱疮;CXCR5;ICOS;氦氖激光;疗效;皮损

[中图分类号]R753.1    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2019）08-0056-03

大疱性类天疱疮是一种以红斑和水疱为主的慢性获得性自身免疫性大疱病，多见于60岁以上老人，女性略多于男性[1]。严重影响患者的生活质量，严重者甚至可危及生命健康[2-3]。此外，面部、结膜及口腔黏膜也是疾病的好发部位之一，对患者容貌造成较大影响。加快皮损愈合是提高患者生活质量，降低死亡率的关键。近年来，激光技术发展迅速，氦氖激光波长为632.8nm，是低强度激光的代表，在皮损治疗中应用广泛[4]。协同刺激因子（Inducible co-stimulator，ICOS）和趋化因子受体5（CXC chemokine receptor 5，CXCR5）是滤泡辅助性T细胞（Follicular helper T cells，Tfh）重要表面分子之一，参与某些自身免疫性疾病发病机制，但关于其与大疱性类天疱疮相关性的研究较少[5-6]。本研究选取笔者医院诊治的84例大疱性类天疱疮患者为研究对象，分析氦氖激光治疗对皮损CXCR5、ICOS的影响，并探讨其与疗效的关系。

1  资料和方法

1.1 一般资料：选取2012年1月-2018年8月于笔者医院诊治的84例大疱性类天疱疮患者，采用随机数字法分为对照组和实验组。其中对照组42例，男20例，女22例;平均年龄（60.45±3.92）岁;平均病程（26.45±2.84）个月;自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分（autoimmune herpes skin disorder intensity score，ABSIS）[7]：（75.16±5.78）分;皮损严重程度：轻度8例，中度25例，重度9例。实验组42例，男21例，女21例;平均年龄（61.31±3.85）岁;平均病程（27.31±3.04）个月;ABSIS评分：（76.31±6.21）分;皮损严重程度：轻度7例，中度24例，重度11例。两组患者性别、年龄、病程、ABSIS评分比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 纳入及排除标准：纳入标准：①临床表现及相关检查符合中国医师协会皮肤科医师分会自身免疫性疾病亚专业委员制定的大疱性类天疱疮诊疗标准[8];②近3个月未接受其它任何治疗者;③自愿签署知情同意书。排除标准：①合并其它疱病者;②合并其它皮肤疾病者;③合并肿瘤者;④伴精神疾病或家族史者。本研究已通过伦理委员会批准。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法：对照组：给予常规糖皮质激素治疗，本院主要采用泼尼松（浙江仙琚制药股份有限公司制，规格：5mg/片，生产批号：111018/140516/170425），其中轻度皮损者首剂予0.4mg/kg/d，中度皮损者首剂予0.5mg/kg/d，重度皮损者首剂0.75mg/kg/d。实验组在此基础上予以氦氖激光（JH30A氦氖激光治疗仪，上海晟昶光电技术有限公司）局部照射皮损处，每处照射15～20min，若皮损面积较大者可考虑分点分片进行照射，除此之外，两组还需给予补钾、补钙及胃肠道保护等。两组均连续治疗8周。

1.3.2 标本留取方法：疱液标本取自患者未感染水疱处，后将其以3 000r/min离心5min，保留上清液，-80℃保存，待检测。

1.3.3 检查方法：用酶联免疫实验中双抗体夹心法检测两组治疗前和治疗后2周、4周及6周疱液中CXCR5、ICOS含量，具体步骤参照相关说明书进行，主要原理：①酶标板上包被CXCR5和ICOS单抗;②添加各浓度标准品和样品与单抗充分结合;③添加二抗，即生物素抗人CXCR5/ICOS抗体;④终止，酶标仪450nm处检测相应OD值，并计算其浓度。

1.4 观察指标：比較两组治疗前、治疗后2周、4周及6周疱液中CXCR5、ICOS含量变化;比较两组皮损控制时间（从入组开始计算，无新疱长出时间、皮损面基本无渗出时间和愈合时间）;比较两组治疗效果（痊愈、显效、好转和无效）。

1.5 疗效评判标准：参考中国医师协会皮肤科医师分会自身免疫性疾病亚专业委员制定的大疱性类天疱疮诊疗标准，痊愈：皮损面完全干燥、结痂，且症状消失者;显效：以上标准达到2/3，症状明显减轻者;好转：以上标准达1/2，症状稍减轻者;无效是指以上标准不足1/2，症状无明显好转者。其中痊愈、显效及好转均认为有效。

1.6 统计学分析：本研究所有数据均用SPSS 20.0统计学软件进行分析，计量资料用均数±标准差描述，用t检验进行比较;计数资料用构成比表示，用卡方检验进行比较;以P<0.05表示差异有统计学意义。

2  結果

2.1 两组治疗前后疱液CXCR5、ICOS含量变化比较：治疗前两组CXCR5、ICOS含量比较，差异无统计学意义（P>0.05）;与治疗前比较，治疗后2周、4周和6周疱液CXCR5、ICOS含量明显降低，且实验组明显低于对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 两组破损控制时间比较：与对照组比较，实验组无新疱长出时间、皮损面基本无渗出时间和愈合时间均明显缩短，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 两组患者临床疗效比较：与对照组比较，实验组总有效率明显升高，且差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.4 CXCR5、ICOS含量与疗效的关系：治疗有效者治疗前疱液中CXCR5和ICOS含量明显低于无效者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

3  讨论

迄今为止，大疱性类天疱疮诊断主要依靠临床表现、皮肤组织病理和血循环抗体等，有创，且敏感性及特异性相对较低，对患者和临床工作者均不利[9-10]。因此寻找特异性好且创伤小的有效指标十分关键。滤泡辅助性T细胞（Follicular helper T cell，Tfh）是一种介导初始B细胞及记忆B细胞活化的特殊CD4阳性T淋巴细胞，在自身免疫性疾病中占有重要地位，与干燥综合征、类风湿关节炎及重症肌无力等疾病密切相关[11]。近年，随研究不断深入发现：CXCR5作为趋化因子受体，对Tfh细胞在淋巴滤泡中的重新定位中至关重要，是其产生及发展的重要表面标志物之一;血清CXCR5最容易被测量，已在部分自身免疫性疾病的血清检测中得到广泛应用[12-13]。ICOS属于CD28家族，可在Tfh细胞表面高表达，与抗原提呈细胞表面配体ICOSL结合，以调节Tfh细胞产生、维持及功能[14-15]，姜蔚蔚[16]等通过对3例大疱性类天疱疮伴恶性肿瘤研究报道大疱性类天疱疮疱液中CXCR5和ICOS含量与其发病有一定相关性，仍须增加样本量继续探讨，但对CXCR5、ICOS含量与大疱性类天疱疮临床疗效之间的关系尚不清楚。氦氖激光不仅可促进血管扩张，加快血液循环、成纤维细胞增殖、皮损周围组织再生，还具有抑制细菌生长、消炎止痛等作用，最终促进皮损愈合;王利霞[17]等通过对69例天疱疮、大疱性类天疱疮患者进行氦氖激光联合治疗肯定了氦氖激光对大疱性类天疱疮皮损治疗的有效性，但对其与疱液中CXCR5和ICOS含量的相关性尚不清楚。

本研究用ELISA检测两组患者治疗前后疱液中CXCR5和ICOS含量，发现治疗后两组含量均明显降低，提示糖皮质激素常规治疗和氦氖激光治疗均可降低CXCR5和ICOS含量，而实验组CXCR5和ICOS含量明显低于对照组，提示氦氖激光联合治疗对CXCR5和ICOS含量的影响强于糖皮质激素常规治疗。本研究还发现氦氖激光联合治疗组无新疱长出时间、皮损面无渗出时间和愈合时间均明显短于对照组，且实验组总有效率明显高于对照组，显示了联合治疗的必要性。比较分析有效者和无效者治疗前疱液中CXCR5和ICOS含量，发现治疗有效者治疗前疱液中CXCR5和ICOS含量明显低于无效者，提示CXCR5和ICOS含量检测对大疱性类天疱疮疗效评估具有一定价值，含量越高，疗效越差，治疗期间可作出适当调整，以实现个体化治疗目的。

研究认为，氦氖激光联合治疗大疱性类天疱疮可有效提高疗效，可能与疱液中CXCR5和ICOS表达水平相关，但具体机制有待进一步探讨。

[参考文献]

[1]中国医师协会皮肤科医师分会自身免疫性疾病亚专业委员.大疱性类天疱疮诊断和治疗的专家建议[J].中华皮肤科杂志，2016，49（6）：384-387.

[2]楼小航，刘继峰，吴纪龙，等.大疱性类天疱疮患者感染分析[J].中华医院感染学杂志，2017，27（9）：2009-2011.

[3]SinemBa?c? I??n IS，Horváth ON，Ruzicka T，et al.Bullous pemphigoid[J].Autoimmun Rev，2017，16（5）：445-455.

[4]Sardari F， Ahrari F.The effect of low-level helium-neon laser on oral wound healing[J].Dent Res J （Isfahan），2016，13（1）：24-29.

[5]Viisanen T，Ihantola EL，Nnt-Salonen K，et al.Circulating CXCR5+PD-1+ICOS+ follicular T helper cells are increased close to the diagnosis of type 1 diabetes in children with multiple autoantibodies[J].Diabetes，2017，66（2）：437-447.

[6]Sacquin A，Gador M，Fazilleau N.The strength of BCR signaling shapes terminal development of follicular helper T cells in mice[J].Eur J Immunol，2017，47（8）：1295-1304.

[7]刘艺迪，左亚刚，李丽.大疱性类天疱疮临床评估指标的研究进展[J].中华皮肤科杂志，2016，49（1）：65-68.

[8]向光，何湘.皮肤性病学[M].武汉：华中科技大学出版社，2014：226-228.

[9]Bernard P，Antonicelli F.Bullous pemphigoid：a review of its diagnosis，associations and treatment[J].Am J Clin Dermatol，2017，18（4）：513-528.

[10]Balestri R，Magnano M，La Placa M，et al.Malignancies in bullous pemphigoid：a controversial association[J].J Dermatol，2016，43（2）：125-133.

[11]Ma CS，Phan TG.Here，there and everywhere：T follicular helper cells on the move[J].Immunology，2017，152（3）：382-387.

[12]He R，Hou S，Liu C，et al.Follicular CXCR5-expressing CD8+ T cells

curtail chronic viral infection[J].Nature，2016，537（7620）：412-428.

[13]Leong YA，Chen Y，Ong HS，et al.CXCR5（+） follicular cytotoxic T cells control viral infection in B cell follicles[J].Nat Immunol，2016，17（10）：1187-1196.

[14]Lownik JC，Luker AJ，Damle SR，et al.ADAM10-Mediated ICOS ligand shedding on B cells is necessary for proper T cell ICOS regulation and T follicular helper responses[J].J Immunol，2017，199（7）：2305-2315.

[15]Wikenheiser DJ，Stumhofer JS.ICOS Co-stimulation：friend or foe？[J].Front Immunol，2016，10（7）：304-315.

[16]姜蔚蔚.大皰性类天疱疮伴发恶性肿瘤3例临床分析及CXCR5、

ICOS在其疱液中的水平及意义[D].大连：大连医科大学，2016：1-17.

[17]王利霞，甘才斌，张晓宁，等.氦氖激光应用于天疱疮、大疱性类天疱疮的临床研究[J].中国医药导报，2014，11（9）：68-70.

[收稿日期]2018-12-30

本文引用格式：武瑞霞，高涛.氦氖激光治疗对大疱性类天疱疮皮损CXCR5和ICOS的影响及疗效相关性分析[J].中国美容医学，2019，28（8）：56-59.