曹仲厚

（长江航务管理局疾病预防控制中心检验科 湖北 武汉 430000）

1.资料与方法

1.1 一般资料

将我科2015年3月至2018年3月收治的60例小儿血管瘤患者及同时期于我科行体检的20例非血管瘤儿童作为观察对照，以血管瘤患者为血管瘤组，以非血管瘤患者为对照组。所有血管瘤患儿均符合小儿血管瘤的诊断标准，且为初次发病，首次就诊，并除外患有其他小儿疾病者，所有患儿均由家属签署知情同意书。血管瘤组，男33例，女37 例，年龄1～6岁，平均（3.35±1.17）岁，病程3个月～13个月，平均（6.89±3.18）个月。血管瘤组，男33例，女37例，年龄1-6岁，平均（3.35±1.17）岁，病程3 个月-13 个月，平均（6.89±3.18）个月。对照组，男12例，女8例，年龄1-7岁，平均（3.81±1.31）岁，病程4个月～12个月，平均（6.37±3.28）个月。两组性别、年龄及病程比较无统计学意义，P＞0.05，具可比性。同时根据血管瘤分期将患者分为增生期组及消退期组，患者分别为33例及27例。

1.2 检测方法

将所有标本进行10%福尔马林固定处理，并石蜡包埋。按Trizol一步法提取标本内的RNA，将提取后的RNA 通过DEPC 溶液稀释50倍，选用酶标仪测量OD260、OD280 以及OD260/OD280，同时计算出现标本的Toal RNA 含量。根据试剂盒说明书进行逆转录，逆转录后，取15ng cDNA 扩增，扩增有效率达95%以上时，即可排除非特异性扩增及引物二聚体。根据样本荧光强度检测样本PI3k 和p-Akt 表达水平。

1.3 观察指标

所有入选血管瘤患儿均于入选第二日进行血管瘤标本采集，同时对照组儿童随机选取部位采集皮肤标本，进行PI3k mRNA及p-Akt mRNA检测。同时对血管瘤组中不同分期患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量差异进行分析。

1.4 统计学方法

以SPSS19.0分析，PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 均为计量数据，以均数±标准差表示，应用t 检验及ROC 分析进行分析。当P＜0.05时为有统计学意义。

2.结果

2.1 PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差异

血管瘤组患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量明显高于对照组（P＜0.05）。

表1 PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差异

2.2 不同分期PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差异

血管瘤组患者中，增生期组患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 明显高于消退期组（P＜0.05）。

表2 不同分期PI3k mRNA及p-Akt mRNA含量差异

3.讨论

小儿血管瘤具有毛细血管瘤、蔓状血管瘤、海绵状血管瘤和混合型血管瘤、血管瘤性综合征等几种分型，这些肿瘤多集中于头颈部，通常于患儿出生几周内出现，并于数个月内快速增大，待患儿年龄超过1 岁以后，症状可于数年内逐步衰退。现代研究显示，血管瘤发生发展可能与细胞间的信号传递以及内皮细胞基因表达异常有关。我们的研究中，血管瘤组患者p-Akt mRNA 含量为0.068±0.015，明显高于对照组，提示p-Akt 参与到了血管瘤内皮细胞凋亡过程中。我们对比不同分期PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量差异发现，血管瘤组患者中，增生期组患者PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 含量明显高于消退期组，这也证明了PI3k、p-Akt 参与并介导了血管瘤内皮细胞的凋亡过程。

综上所述，PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 检测对小儿血管瘤的诊断及临床分期存在显著意义，小儿血管瘤患者的PI3k、p-Akt 表达水平显著高于正常儿童。且增生期患儿PI3k、p-Akt 表达水平显著高于消退期患儿，临床可将PI3k mRNA 及p-Akt mRNA 检测作为诊断及评估小儿血管瘤分期的依据。