罗浩，刘四清

（川北医学院附属第二医院妇产科，绵阳 621000）

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，卵巢癌的病死率在各类妇科肿瘤中较高。核因子－κB（NF-κB）是核转录调节因子，它在调控细胞增殖与凋亡的过程中发挥着重要作用，一般情况下，NF-κB在细胞胞浆中没有活性，当化疗药物、射线等因素刺激时，即发生磷酸化、泛素化，NF-κB随之活化并转位入核，调节靶基因的转录。目前，已有学者［1，2］提出 NF-κB及其信号通路是肿瘤治疗的一个策略。为此，本研究拟探讨NF－κB通道的激活及其与肿瘤血管形成的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集本院2008年～2014年卵巢癌患者47例，年龄25～75岁。患者均接受了卵巢切除术，且均为首次发病，未接受过化疗、放疗及药物治疗。患者术后行病理检测，Ⅰ期组12例，Ⅱ期组20例，Ⅲ/Ⅳ期组15例，另选正常卵巢20例为对照组。所有患者在我院手术室切取标本后，立即在肿瘤组织处取1 cm×1cm×1cm大小组织块。

1.2 实验试剂与器材

NF-κB抗体、IL-2抗体、血管内皮生长因子（VEGF）抗体、SABC免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒等（所有试剂均购于上海研卉生物科技有限公司），Olympus光学显微镜、光学显微镜照相系统和Image-Pro Plus图像分析系统等。

1.3 免疫组织化学方法（SABC）测定 NF－κB、IL-2和VEGF的表达

采用SABC法，步骤简述如下：1）切片常规脱蜡至水，3%H2O2室温孵育5～10min，以消除内源性过氧化物酶的活性；2）蒸馏水冲洗，PBS浸泡5 min；3）用山羊血清封闭液封闭，室温孵育10min，倒去血清，0.02%PBS漂洗5min×3次；4）滴加一抗，其中P-JAK2（1∶500）、P-STAT3（1∶350）于4℃冰箱过夜，0.02%PBS漂洗5min×3次，再用PBS取代一抗用作空白对照；5）加入二抗，室温孵育20min，0.02%PBS漂洗5min×3次；……