杜 琴，卢小岚，王 强,3，汪光蓉,3，罗文依，王舒琪，姚丽华，张国元，刘剑平，王东生△

(1.川北医学院附属医院检验科，四川南充 637000；2.川北医学院医学检验系，四川南充 637000；3.川北医学院医学转化医学研究中心，四川南充 637000;4.川北医学院附属医院医学风湿免疫科，四川南充 637000)

干燥综合征(SS)是临床常见的一种自身免疫性疾病，其血清中可检出多种自身抗体，以抗SSA抗体和抗SSB抗体最为常见，而抗SSB抗体较抗SSA抗体更为特异，是SS的血清特异性抗体，在原发性SS中阳性率可高达65%～85%。除此之外，抗SSB抗体亦可出现在其他自身免疫性疾病中，与血管炎[1]、高球蛋白血症[2]、肾脏受累和肺病变[1]、腮腺肿大[3]、冷球蛋白血症[4]等相关。目前抗SSB抗体的检测主要采用免疫印迹法(IB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测[5]，但与国外免疫微球技术的检测结果相距甚远[6]。随着我国自动化程度的不断提高，自身抗体的全自动定量检测是未来的必然趋势。因此本文通过基因克隆和重组DNA技术将SSB基因克隆至PET41a载体，构建原核表达质粒，表达并纯化出SSB蛋白，为进一步建立抗SSB抗体的全自动定量检测磁微粒化学发光试剂提供实验基础,现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1一般资料 收集川北医学院附属医院2016年1月至2017年12月经欧蒙免疫印迹法检出的抗SSB抗体阳性患者的血清115例。

1.2试剂 PET41a质粒购自德国Novagen公司，异丙基-β-D- 硫代半乳糖苷 (Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside，IPTG)购自美国Sigma 公司；限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ及T4 DNA连接酶和高保真聚合酶均购自日本TaKaRa公司；大肠埃希菌DH5α、DNA ladder、质粒提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；……