陈圆圆，叶 星，颜峰平

(赣南医学院法医学系，江西 赣州 341000)

急性心肌缺血是造成心脏性猝死的主要原因, 而一定时间缺血后再灌注不但可以加重心肌损伤, 还可造成致命性心律失常，甚至引起心脏性猝死。司法鉴定实际工作中，有很多情况是由冠状动脉痉挛突然缓解和血栓溶解后再灌注所造成。此种情况下，由于缺血时间过短, 常规HE等染色技术看不出心肌的明显变化, 难以作出心脏性猝死的诊断, 给司法鉴定工作带来很大困难。因此寻找早期心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, I/R损伤)的敏感性生物标志物具有重要的法医学应用价值。

miRNA是一种内源性长度大约为21～25个碱基的非编码RNA，通过降解目的基因或抑制目的基因翻译来进行转录后调控[1]。miRNA在急性心肌梗死、心力衰竭[2-3]、心律失常[4]等不同的心脏疾病中均出现异常的表达，被认为可能成为心血管疾病诊断、治疗及预后的生物学标记物。本研究通过构建小鼠心肌缺血后再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤模型，用miRNA芯片技术筛选心肌缺血后呈差异表达的miRNAs，为研究早期心肌缺血的发病机制提供重要的理论基础，并为心源性猝死的法医学鉴定提供一定的依据。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物健康雄性C57 BL/J小鼠20只，体重25～30 g，购自上海杰思捷实验动物有限公司。

1.1.2主要试剂及仪器5%水合氯醛(Sigma)，TRIzol试剂(Invitrogen)，Mir-X miRNA First-Strand试剂盒(Clontech)，SYBR Green PCR试剂盒(Qiagen)，PCR引物(上海生工生物工程股份有限公司)，小动物呼吸机(SAR-830，CWE)，多通道生理记录仪(上海嘉龙教仪厂)，荧光定量PCR仪(Applied Biosystems)。

1.2实验方法

1.2.1动物分组和模型建立小鼠随机分为2组，每组10只，分别为I/R组和对照组。……