胡承

南京威尔药业股份有限公司 江苏南京 210000

蛋黄卵磷脂是蛋黄中磷脂的总称，主要含有磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）、神经鞘磷脂（SPM）等，此外还存在因制备工艺和储存条件不当导致的降解杂质，如溶血磷脂酰胆碱（LPC）、溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）等。

注射用蛋黄卵磷脂主要应用于药物制剂中脂肪乳的关键辅料，在脂肪乳制剂中起到乳化作用，其中注射用蛋黄卵磷脂的关键指标包括有关物质、过氧化值、游离脂肪酸等指标，其质量好坏直接影响脂肪乳制剂相关指标[1]。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

蛋黄粉PL-30，食品级，北京华夏厚德生物科技有限公司；无水乙醇，分析纯，南京化学试剂有限公司；丙酮，分析纯，南京化学试剂有限公司。

1.2 实验步骤

取计量的蛋黄粉投入到1L三口烧瓶中，按照一定比例加入无水乙醇，在一定温度下进行搅拌提取，过滤得滤液，滤液通过旋转蒸发仪浓缩至一定比例得蛋黄卵磷脂粗品。

另取1L烧瓶加入过量的丙酮，开启搅拌，在冷阱中降温，将蛋黄卵磷脂粗品滴加至丙酮中，继续降温至-18℃，搅拌1h，过滤得粉末状固体。

将粉末状固体转至单口烧瓶中，在冰水浴中进行减压旋蒸干燥得成品。

2 结果与讨论

2.1 乙醇提取比例和提取次数对含量和收率的影响

在乙醇提取时间为2小时，提取温度为50℃的情况下，分别考察乙醇与蛋黄粉PL-30比例为5:1，7:1，10:1（V：W）时一次提取和二次提取对提取收率的影响，结果如下表所示：

乙醇：PL-30（V：W） PC含量 一次提取收率 二次提取收率5:1 83.90% 67.56% 82.90%7:1 80.12% 78.71% 95.91%10:1 78.79% 79.55% 96.34%

由上表可以看出，随着溶剂用量的增大，PC含量逐渐降低，产品收率逐渐升高。当乙醇与PL-30比例为7:1时，样品的一次提取和二次提取的收率均较高，PC含量较高，和溶剂比例为10:1水平接近，但是考虑到后者溶剂用量较大，因此最终确定乙醇与PL-30的提取比例为7:1。

并且由上表可以看出，当乙醇提取次数为两次比乙醇提取次数为一次时收率均有约15个百分点的提升，二次提取能大大提升产品的收率，因此进行二次提取。

2.2 乙醇提取温度对收率和酸值的影响

在乙醇与PL-30的提取比例为7:1，提取次数为一次，提取时间为2小时的情况下，分别考察提取温度为30、40、50、60℃时，对产品酸值和收率的影响，提取温度（℃）分别为30、40、50、60时，酸值（mgKOH/g）分别为14．88、15．81、16．10、17．30，收率（%）分别为 76．0、82．8、86．0、86．7。

由数据可以看出，随着提取温度的上升产品的收率会随之增加，但是不难发现，提取温度为50℃和60℃时产品的收率相差不大；另一方面，随着温度的升高，产品的酸值也随之升高，且当温度为60℃时，产品的酸值变化较大，因此最终选取提取温度为50℃，此时的收率相对较高且酸值较低[2]。

2.3 乙醇与蛋黄卵磷脂粗品比例的确定

在上述确定的提取条件下，对PL-30提取，将提取液浓缩至含固量分别为86%、76%、71%、68%时，在丙酮溶液中进行共沉淀，并进行低温干燥得成品，考察蛋黄卵磷脂粗品含固量对其外观状态的影响，含固量分别为86%、76%、71%、68%时，成品外观呈现棕色块状、黄色块状、乳白色粉末、乳白色粉末。

从数据可以看出，随着含固量的增大，成品由乳白色粉末变为黄色块状，2015版《中国药典》对蛋黄卵磷脂（供注射用）外观要求为乳白色或蛋黄粉的粉末或块状，从上述结果可以看出当含固量为71%产品外观状态较好，且乙醇残留较少。因此蛋黄卵磷脂粗品含固量定为71%[3]。

2.4 干燥时间的确定

将得到的蛋黄卵磷脂滤固，加入单口烧瓶中，在冰水浴中减压干燥，考察干燥时间对溶剂残留的影响。干燥时间3/6/9/12小时，乙醇残留（%）分别为0．2525/0．2039/0．1953/0．1143丙酮残留（%）分别为 0．0349/0．0078/0．0045/0．0031。

从数据可以看出，随着干燥时间段增加，溶剂残留逐渐降低，但是如果干燥时间过长，带来能耗较大，当干燥时间为9小时时，乙醇才能满足中国药典上对于蛋黄卵磷脂（供注射用）溶剂残留的要求（乙醇、丙酮≤0．2%）。因此为了保证产品的溶剂残留指标合格，产品干燥时间至少要9小时。

3 结语

本工艺是通过乙醇提取食品级蛋黄粉PL-30，其中乙醇提取溶剂比例为7:1，提取次数两次，提取温度为50℃，再将提取液浓缩至含固量为71%的蛋黄卵磷脂粗品，通过丙酮共沉淀，低温干燥，得到粉末或颗粒状的蛋黄卵磷脂。其中产品酸值较低，工艺较为简单，且产品外观形态较好，检测指标符合2015版《中国药典》蛋黄卵磷脂（供注射用）标准。