杨春梅，刘圆圆

脑卒中具有高发病率、高致残率、高致死率和高复发率的特点，给世界各国，尤其是发展中国家带来很重的经济负担。75%以上的脑卒中为缺血性脑卒中(acute ischemic stroke, AIS)[1-2]，AIS的发生受高血压、吸烟、饮酒、基因多态性等多种危险因素的影响[3]。载脂蛋白E(apolipoprotein E, ApoE)在富含三酰甘油的脂蛋白代谢过程中发挥重要的作用。ApoE基因多态性是由其编码基因19q13.2第4号外显子的碱基替换引起的，ApoE E3等位基因在人群中的频率为79%，称为“野生型”[4]。流行病学研究发现，ApoE基因多态性与脑血管疾病的发病率及预后密切相关[5]：与ApoE E3等位基因相比，E2等位基因增高机体三酰甘油和胆固醇水平；E4等位基因使血清中胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)和载脂蛋白B(ApoB)水平升高，导致动脉粥样硬化、高脂血症及其他心血管疾病[6，7]。血浆中ApoE水平升高可增加脑卒中的风险，然而关于ApoE等位基因多态性与AIS关系及其近期预后预测价值仍存在争议。本研究旨在阐明ApoE基因型多态性在预测中国AIS近期预后的作用。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2016-01至2018-01在我院住院治疗的急性AIS患者445例，作为初发AIS组。诊断标准参照中国急性缺血性脑卒中诊疗指南 (2014)，通过CT或MRI确诊。排除既往脑卒中病史、原发性蛛网膜下腔出血病史，以及痴呆病史的患者。同时选取健康体检者363名作为对照组，排除标准同上。

1.2 方法 急性AIS患者在入院时(24 h内)由经验丰富的医师使用改良Rankin量表(modified Rankin scale, mRS)进行评估。在患者出院6个月后对其进行电话随访，记录mRS评分。两组均进行以下操作：

从全血样品中提取基因组DNA(QIAGEN)，采用荧光定量PCR的方法检测ApoE基因分型。引物序列如下：上游引物5′-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC；下游引物5′-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA。

采用罗氏5800全自动生化分析仪，检测血清中的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖水平。

2 结 果

2.1 两组ApoE基因型分布及一般临床资料比较 两组在年龄、性别、高血压病史、糖尿病史、冠心病史、吸烟比例、血脂，以及空腹血糖等方面比较，差异均无统计学意义(P>0.05，表1)。

2.2 两组ApoE基因型分布 ApoE基因经荧光定量PCR扩增后，可分为3种常见基因型：E2(E2/E2、E2/E3)，E3(E3/E3、E2/E4)，E4(E3/E4、E4/E4)，本研究仅在初发AIS组出现1例E2/E4患者，在基因型统计处理中，将其归于E3基因型。初发AIS组 ApoE基因型分布与对照组有统计学差异(χ2=13.31，P<0.01，表2)。

表1 初发AIS组与对照组的一般情况比较 (n;%)

表2 初发AIS组与对照组ApoE基因型的分布 (n;%)

注：两组ApoE基因型比较，χ2=13.31，P<0.01

2.3 初发AIS患者24 h内mRS评分与ApoE等位基因分布 初发AIS组患者入院后24 h内进行mRS评分，根据mRS评分将受试者分为两组，mRS≤2(n=248)组和mRS>2组(n=197)。两组均以E2型最少，E3基因型占优势。但mRS>2组患者ApoE基因型分布与mRS≤2组显著不同(χ2=7.70，P<0.01，表3)。

表3 入院24 h内初发AIS患者mRS评分与ApoE等位基因的分布 (n;%)

注：两组ApoE基因型比较，χ2=7.70，P<0.01

2.4 初发AIS患者6个月后mRS评分与ApoE基因型的分布 患者出院后6个月电话回访，并进行mRS评分，mRS≤2组患者由入院时的248例增加至367例，mRS>2组的患者由入院时的248例减少至78例。出院6个月后，mRS>2组患者ApoE基因分型与mRS≤2组显著不同(χ2=11.31，P<0.01，表4)。

表4 出院6个月后初发AIS患者mRS评分与ApoE基因型的分布 (n;%)

注：两组ApoE基因型比较，χ2=11.31，P<0.01

3 讨 论

ApoE是调节体内胆固醇和三酰甘油代谢中重要的载脂蛋白[8]。携带不同ApoE等位基因的人群，其LDL-C水平也不相同，通常携带E2等位基因的人群LDL-C水平最低, 携带E4等位基因的人群LDL-C水平最高，而携带E3等位基因者其LDL-C水平介于两者之间[9]。但是，在本研究中并未发现ApoE不同等位基因与血脂的上述相关性，主要与大多数高脂血症患者已经服用降脂药物治疗有关。

研究发现，携带ApoE E4等位基因是动脉粥样硬化的预测因素，并与AIS和出血性脑卒中的发生密切相关[10]。McCarron等[11]发现，ApoE E4等位基因增加脑卒中的风险。Alberts等[12]证实，脑出血患者中携带ApoE E4 等位基因的存活率低于非ApoE E4 等位基因携带者。然而，一部分研究并未发现ApoE基因多态性与缺血性脑卒中发生的相关性，并且认为其对AIS后的功能恢复没有重大影响[13]。因此，ApoE等位基因多态性是否能够作为AIS的风险因素及能否有助于预后判断仍然存在争议，导致争议的原因可能包括：(1)研究对象的种族差异；(2)不同检测方法得出的ApoE等位基因分型结果不完全一致；(3)样本量过小，存在统计学偏倚等。

本研究发现，初发AIS患者与对照组相比，ApoE基因型分布显著不同。在初发AIS患者，ApoE基因型的不同分布不仅与入院时mRS评分密切相关，而且与出院后6个月mRS评分相关。提示ApoE基因多态性不仅与AIS初次发病风险增加相关，而且与AIS的严重程度及短期预后有关。

总之，我们观察到在初发AIS患者中ApoE多态性与AIS初次发生及预后之间的关联。但是，由于样本量较小及种族的限制，本研究的结论需进一步大样本及多种族的研究结果来验证。