Yap介导瑞芬太尼预处理促进肝切除小鼠术后肝再生
2019-07-13殷苏晴杨瑜汀焦英甫杨立群
殷苏晴 朱 玲 杨瑜汀 崔 璀 高 雄 高 坡 焦英甫 杨立群
瑞芬太尼是临床麻醉中常用的阿片类镇痛药物。已有大量研究结果表明,瑞芬太尼对于肝脏手术过程中的相关脏器损伤具有一定的保护作用[1-2],同时在一定程度上具有维持血流动力学稳定、缩短机械通气时间、保护肝功能等优点[3-4]。本课题组的前期研究首次阐明了瑞芬太尼对于肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制[5]。在肝再生模型中,70%肝切除后剩余的部分肝脏不可避免地遭受氧化应激损伤,瑞芬太尼在肝切除后的肝再生过程中的作用尚无相关研究。本研究旨在探讨瑞芬太尼预处理对于70%肝脏切除术后肝再生的作用及其可能机制,为临床围术期应用瑞芬太尼提供更多的依据和支持。
1 材料与方法
1.1 实验动物和材料 雄性BALB/c小鼠,6~8周龄,购自上海必凯实验动物有限公司。Ki-67(#12202)、Yap(#14074)、磷酸化Yap(p-Yap,#4911)、GAPDH(#97166)抗体均购自美国Cell Signaling Technology公司,Reverse Transcriptase反转录试剂盒购自日本TAKARA生物科技有限公司,TRIzol和实时荧光定量核酸扩增检测系统的SYBR GREEN购自南京诺唯赞生物科技有限公司。
1.2 70%肝切除模型的建立和分组 实验动物予适应性喂养1周后,将其随机分入对照组和瑞芬太尼组。瑞芬太尼组小鼠在肝切除前20~30 min于腹腔内注射瑞芬太尼30 μg/kg(剂量依据本课题组前期实验[6]结果),对照组予等量0.9%氯化钠溶液。之后用异氟烷麻醉小鼠,并采用改良Higgins和Anderson法行70%肝切除术。依据观察时间点,分别在70%肝切除术后6、24、36、48、120、192 h收集小鼠的血清和肝脏标本。
1.3 肝体比 分别于70%肝切除术后6、24、36、48、120、192 h取血后摘取两组小鼠剩余30%的肝脏组织,计算肝体比。……
