胡长玉 ，叶玉娟 ，马寅集 ，马雪泷 ，房江育

（1.黄山学院生命与环境科学学院，安徽黄山 245041；2.安徽省祁门红茶发展有限公司，安徽祁门245600）

茶树为双子叶植物，其种子中肥厚的两片子叶里面积累有丰富的营养物质，供给茶籽萌发时期和幼苗早期生长阶段对养分的需要[1]。在生产实践中茶树实生苗在苗期是不需要人为补充肥料的。随着科学界揭示茶树根系为体内茶氨酸等氨基酸的合成部位[2]，因而人们可以通过气雾栽培等措施不断获取茶苗根系，使其成为获取茶氨酸等天然产物的重要原料[3]。为了使得茶籽苗在气雾栽培前的剪根环节获得更多的氨基酸，对茶籽苗喷施N、PK、NPK三种叶面肥，比较茶苗生长以及根系中的氨基酸含量差异。本结果也将为气雾栽培叶面肥的喷施具有指导意义。

1 材料与方法

1.1 茶籽萌发与栽培

将成熟的鸠坑品种茶树种子保存于实验室7～13oC，相对湿度40～50%环境条件下，次年3月20～23日后在室内用自来水浸泡，每天清洗种子2次，大约15d后将沉入水底、种皮开裂的茶树种子取出，按照行距10cm/株，播种于大棚里面的珍珠岩中（图1）。每天观察珍珠岩的湿度，必要时喷水：以珍珠岩抓在手中捏成团，伸手即散开为喷水标准。5月5～8日后茶苗陆续破土。从6月5日～7月24日前期的40d中，每周喷施一次叶面肥共喷 5次，以喷自来水为对照。叶面肥有3种：N肥为0.1%尿素，PK肥为0.2%KH2PO3，NPK肥为单周喷0.1%尿素和双周喷0.2%KH2PO3。

1.2 茶苗生长测量与生化指标测定

将茶苗从珍珠岩中挖出，每个处理随机取40株，用自来水洗净根上的珍珠岩，用吸水纸快速吸下表面水分，称苗重和根重（根重以10株为一个试验单位称量），计数叶片数，测量地上高、最大叶片的长和宽、主根长；用Dualex便携式植物多酚-叶绿素仪（法国Force-A公司）测定第三片叶片中叶绿素含量、茶多酚含量以及N平衡指数。用多功能酶标仪（奥地利Spectra Max i3x）测定茶苗根系中的游离氨基酸总量[4]。根系中茶氨酸含量参照国标用HPLC（大连依利特分析仪器有限公司3100高效液相色谱仪）法测定[5]，色谱柱为依利特 AAK氨基酸专用柱。用SPSS20.0对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

观察各处理下茶苗的形态（图1），可以看出叶面肥对茶苗早期的生长具有促进作用，表现在茶苗普遍增高，叶片增多，变大，根系更加发达。除了N肥处理下根系色泽有褐化外，其余处理和对照的根系皆为纯白色。

图1 喷施叶面肥后的茶苗（从左往右：左1，对照；左2，N肥；左3，PK肥；左4：NPK肥）

除根重在各个处理中没有差异外（根重显著性水平p=0.58），茶籽苗其余8个指标在不同处理之间的差异均达到显著或极显著水平（p＜0.5或0.1）。由此，必须通过多重比较进一步了解究竟哪些处理之间有差异。

对需要进一步分析的8个指标进行方差齐性检验后，有4个指标包括苗重、地上高、最大叶片和多酚含量等在各处理中的显著性p＜0.1，表明不同处理之间的方差不齐，因此选择“Tamhane's T2(M)”方法进行两两比较[6]；而另外4个指标包括叶片数、根长、叶绿素含量和N平衡指数的方差检验结果是齐性（p＞0.1），所以选择”S-N-K”方法比较各处理均值[6]。

与不施肥的茶籽苗相比，喷施N肥和NPK叶面肥能够显著或极显著地增加苗重（见表1）：N肥苗重提高28.91%，NPK肥苗重则提高64.84%，而喷PK肥后苗重虽然略有提高，却未达到显著水平；由于叶面肥喷施后茶苗根重方差分析不显著，所以不同处理之间根重的不同源于个体间的误差。喷施叶面肥后主根长度受到抑制，比对照缩短7.96%～12.47%。喷施PK肥后茶苗地上高度保持不变，而N肥和NPK处理均极显著地促进了茶苗地上部的生长，苗高分别是对照的1.27倍和1.42倍；与此类似的趋势还有叶片数，N肥处理展叶数是对照的1.13倍，NPK处理是对照的1.19倍，而PK肥的影响不显著。此外，喷施3种叶面肥后茶苗最大叶片的面积都有增加，均达到极显著水平，其中PK肥增加41.03%，N肥增加51.17%，而NPK增加达到95.81%。

表1还表明，3种叶面肥不同程度地提高了茶苗叶片中叶绿素的含量，显著降低叶片中的茶多酚含量，从而有效地提高植株的N平衡指标，它是叶绿素含量与茶多酚含量的比值。对N平衡指标按照从小到大的排序分别为PK肥处理，其叶绿素含量是对照的0.64倍，茶多酚含量仅为对照的82.22%，N平衡指数是对照的1.39倍；其次为NPK处理，其叶片中叶绿素含量是对照的1.32倍，茶多酚含量是对照的82.31%，NN平衡指标是对照的2.17倍；效果最明显的是N肥处理，其叶绿素含量是对照的1.82倍，茶多酚含量仅仅是对照的70.08%，N平衡指数是对照的2.17倍。

与对照相比，3种叶面肥中PK肥有降低根系氨基酸含量的趋势，而N肥和NPK综合处理能够有效提高茶苗根系中游离氨基酸含量和茶氨酸含量（见表2）。在游离氨基酸总量的增加中可以发现，N肥对主根的作用大于NPK肥，而NPK肥料对侧根的作用大于主根，前者使主根中的游离氨基酸总量提高87.04%，后者使侧根中的游离氨基酸总量提高1.04倍。从茶苗整个根系中游离氨基酸总量来看，NPK综合施肥的效果显著，提高了88.99%，N肥次之，提高了42.73%。从茶氨酸含量来看，无论是主根还是侧根，NPK综合肥料的促进作用均大于N肥单独处理：前者使得根系中茶氨酸增加1.01倍，后者仅仅增加9.38%。由此可见，N肥对游离氨基酸含量的贡献是促进多种氨基酸的合成，而NPK综合喷施主要是促进了根系中茶氨酸的合成。

表1 三种叶面肥处理后茶苗生长及其相关指标的测定

表2 三种叶面肥处理后茶苗根系中氨基酸含量

3 讨论与结论

尽管茶籽苗能够依靠两片肥厚的子叶完成早期幼苗的生长，但是外源喷施叶面肥，能够在一定程度上促进它们更快地生长。三种叶面肥均能促进茶苗的生长，只是在程度上有差异，综合各指标的情况，NPK综合喷施肥效最明显，其次为N肥，PK肥的作用相对较弱，说明N、P、K三种元素在茶苗早期生长中均具有正向调节，N元素喷施后，与生长速度有明显正相关，P和K与生长速度正相关性相对较弱。而N、P、K三种元素组合后具有显著的协同效应，这与这三种元素对植物的一般生理作用是一致的[7]。叶面肥对茶苗地上部生长的促进作用比对根系更加明显。叶面肥对茶苗根系生长的调节表现为不影响根重，但限制主根的伸长，由此推断NPK叶面肥可能增加生根量或者促进根系变粗，具体是哪种方式有待进一步确认。由于喷施NPK后茶苗鲜重增加，但根系鲜重不变，所以该生物量源自于肥料对地上部的生长有促进。通过实地测量发现，苗重与地上部高度、叶片数量以及最大叶片面积均呈现正相关关系，相关系数分别为0.774、0.847和0.983。因此，叶面肥对苗期叶片的生长具有显著的促进作用，其中最大叶片叶面积能够灵敏地反映茶苗生长状况。此外，叶面肥极大地促进叶片中叶绿素合成，显著降低多酚的含量，从而有效提高 N平衡指数。

叶面肥对根系的生长调节没有地上部那么明显和全面。从根量和色泽来看，叶面仅仅喷施N肥将不利于茶苗根系的生长。而NPK综合喷施后能够使茶苗根系保持洁白的色泽，表现出健康的状态。然而，叶面肥深刻地影响着茶苗地下部根系中氨基酸的含量。N肥表现出对根系尤其是主根中各类氨基酸的全面增加，PK肥对根系氨基酸有负向调节，但在与N肥共同作用下，NPK三种元素对根系中茶氨酸等氨基酸的合成显著提高，显示出这三种元素对茶苗根系茶氨酸等氨基酸的协同作用。

此外，本试验中茶苗主根和侧根中无论是游离氨基酸总量还是茶氨酸含量，皆为主根要高于侧根。这与一些研究不完全一致[8]。究其原因，可能与不同试验采取的样品的生长阶段有关系。大部分研究者都以三年生以上的茶苗或者茶树为研究对象，而本试验采集的样品处于种子刚刚萌发后的幼苗，还带着子叶，作为幼苗的重要器官，主根尚处于生长旺盛阶段，其吸收与合成作用尚不能完全由侧根取代而担任，因此有较高的氨基酸含量。