LINC00158通过促进脾酪氨酸激酶基因的表达抑制膀胱癌细胞增殖和迁移
2019-06-21程树林李雨根陈双全黄静朱平宇龚志勇
程树林 李雨根 陈双全 黄静 朱平宇 龚志勇
川北医学院附属医院泌尿外科(四川南充637000)
膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之 一,发病率呈逐年上升态势[1]。近年来,针对膀胱癌发生发展的机制研究不断为临床治疗提供新的思路。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200 个核苷酸的转录本,随着lncRNA 研究领域的不断深入,越来越多的lncRNAs 被发现在肿瘤中异常表达,lncRNA 可能成为一种新型的基因治疗工具或肿瘤诊断预后标志物[2-3]。LINC00158 是一种新发现的lncRNA,其在肿瘤尤其是膀胱癌中的作用机制研究未见报道。本研究旨在检测LINC00158 在膀胱癌组织和细胞中的表达,并通过构建转染LINC00158至膀胱癌细胞,观察LINC00158对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响,探究LINC00158可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料 14 例膀胱癌组织标本来源于2016年11月至2018年2月川北医学院附属医院泌尿外科手术切除标本,置于液氮中保存,标本均经病理学确诊。患者均签署本院伦理委员会批准的知情同意书。14 例膀胱癌患者术前均未接受过放化疗。RPMI-1640 培养基、胎牛血清(FBS)和DMEM 培养基购自美国Gibco 公司。膀胱癌细胞株(T24、BIU-87、UMUC-3、J82)和正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)购自武汉典型培养物保藏中心,T24、BIU-87 和J82 细胞使用含10% FBS 的RPMI-1640 培 养 基 培 养,UMUC-3 和SV-HUC-1 使 用 含10% FBS 的DMEM 培养基,培养条件为37 ℃、5%CO2。逆转录试剂盒和荧光实时定量聚合酶链反应(qPCR)试剂盒购自美国Fermentas 公司;含有LINC00158 全长的质粒和对照质粒购自上海捷瑞生物科技有限公司。转染试剂LipofectamineTM2000 Reagent 购自美国Invitrogen 公司;Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司;……
