罗凯 黎谢梦丹 郑国沛 刘浩 贾小婷 王倩 张志杰 贺智敏

广州医科大学附属肿瘤医院/广州医科大学肿瘤研究所（广州510095）

肺癌是严重威胁大众健康的重要恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）约占80% ～85%。目前，以吉非替尼为代表的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI）已成为EGFR 突变型NSCLC 的重要全身治疗手段之一，然而无可避免的EGFR-TKI 耐药严重影响了其临床应用［1］。目前仍有相当比例患者耐药机制未明［2］。因此，进一步寻找EGFRTKI 耐药靶标，阐述耐药机制对于有效逆转EGFRTKI 耐药，提高肺癌综合治疗效果具有十分重要的理论意义和潜在的应用价值。

miRNA 是一类20 bp 左右的单链小分子RNA，其主要通过与靶基因mRNA 的3′非翻译区的部分或完全结合来抑制靶基因mRNA 的翻译过程或促进其降解。越来越多的研究表明miRNA 在肿瘤的发生、发展和治疗中发挥了重要的作用［3-4］。该研究前期已利用吉非替尼敏感NSCLC 细胞HCC827成功构建了继发耐药细胞株HCC827/G 且还排除了目前已知的主要耐药机制在HCC827/G 吉非替尼耐药中的作用，如EGFR 基因T790M 突变等，同时二代测序结果显示HCC827 和HCC827/G 细胞外泌体miRNA 表达谱存在很多差异，其中miR-17-5p在HCC827/G 细胞中表达升高，提示其可能与吉非替尼耐药相关［5］。近来研究表明miR-17-5p 是一种癌基因，促进了多种肿瘤的发生与发展［6］。因此该研究拟证实miR-17-5p 介导NSCLC 吉非替尼耐药的作用并探讨其可能机制，旨在寻找新的耐药靶点。

1 材料与方法

1.1 实验材料 HCC827 细胞株购自中国科学院上海细胞所，HCC827/G 细胞为前期通过低浓度吉非替尼持续诱导HCC827 细胞构建。……