陈 维 李开斌* 杨 文 孙 刚 郎小琴2 孔秋月

1.贵州省安顺市食品药品检验所，贵州 安顺 561000；2.贵阳市花溪区农业局，贵州 贵阳 550025

枳椇子为鼠李科植物枳椇(HoveniaacerbaLindl.)的干燥成熟的种子，别名鸡爪子、拐枣、万寿果等，始载于《唐本草》。具有其功效主要为清热利尿、止渴除烦、解酒毒，主治酒病、烦热、口渴、呕吐、二便不利等症[1]。是贵州习惯使用的中药材，在民间有着广泛的使用历史。枳椇子有解酒毒、护肝、抗衰老、抗疲劳等功效[2-4]。本实验采用ICP-MS法对贵州不同产地枳椇子铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铜(Cu)5种重金属进行测定，初步评价了黔产枳椇子药材的安全性。

1 材料

1.1 样品 10批枳椇子样品均来自贵州不同地州市，由贵阳中医学院植物栽培教研室魏升华教授鉴定为鼠李科植物枳椇(HoveniaacerbaLindl.)的干燥成熟的种子。

1.2 仪器与试剂 NexION2000电感耦合等离子体质谱仪( PerkinElmer)、ETHOS UP微波消解仪(北京莱伯泰科仪器股份有限公司)、千分之一电子分析天平(AY-120，岛津公司)。娃哈哈纯净水(贵阳娃哈哈饮料有限公司)、硝酸(优级纯，国药集团)、Pb标准溶液(C1420073，Aladdin公司)、Cd标准溶液(GSB-04-1712-2004)、Hg标准溶液(GSB-04-1729-2004)、As标准溶液(GSB-04-1714-2004)、Cu标准溶液(GSB-04-1725-2004)、金标准溶液(GSB-04-1715-2004)，均购自国家有色金属及电子材料分析测试中心、内标标准储备溶液(N9301721,PerkinElmer)。

2 方法与结果

2.1 样品前处理 称取样品约0.3 g，精密称定，置于PTFE消解罐中，加入10 mL硝酸，按照微波消解仪给定的消解程序进行消解，消解完毕后在赶酸仪上赶酸浓缩至约1～2 mL，转移至50 mL量瓶中，并用纯净水定容，待测。

2.2 混标及内标溶液制备 参照《中国药典》2015年版四部铅、镉、汞、砷、铜测定中精密量取铅、砷、镉、铜标准品贮备液适量[5]，用10%硝酸溶液稀释制成含铅、砷0、1、5、10、20 ng/mL，含镉0、0.5、2.5、5、10 ng/mL,含铜0、50、l00、200、500 ng/mL的系列浓度混合溶液。另精密量取汞标准品贮备液适量，用10%硝酸溶液稀释制成分别含汞0、0.2、0.5、1、2、5 ng/mL的溶液，本液临用配制。精密量取锗、铟、铋单元素标准溶液适量，用水稀释制成每1mL含1μg的混合溶液，即得。

2.3 ICP-MS仪工作参数 见表1。

表1 ICP-MS仪具体工作参数

2.4 方法学验证

2.4.1 线性关系及检出限 在仪器选定工作参数下对5种元素的标准溶液进行测试，以配置溶液浓度为横坐标(X)，被测元素与内标元素CPS比值为纵坐标(Y)进行线性回归，除不加样品外，其他操作同供试品溶液的制备法，制备空白溶液，连续测定 11 次，以其响应值 3 倍的标准偏差除以相应元素标准曲线的斜率作为不同元素的检出限[6]。得到各元素的回归方程、相关系数、检出限，结果见表2，Pb元素回归曲线见图2。

表2 5种元素的回归方程、线性范围、检出限

2.4.2 精密度实验 取配置的混合标准品铅(5ng/mL)、镉(2.5ng/mL)、铜(100ng/mL)、砷(5ng/mL)中间浓度，汞选取2ng/mL的标准品，在选定测试条件下平行测定 6 次，分别计算铅、镉、汞、砷、铜响应值CPS的RSD值，其分别为2.81%、1.98%、2.25%、1.90%、4.00%仪器精密度良好，符合实验要求。

2.4.3 重复性实验 选择黔东南州三穗县枳椇子按2.1项方法操作，平行6份，测定，计算铅、镉、汞、砷、铜响应值的RSD值分别为9.1%、10.6%、1.2%、0.8%、7.4%试验重复性良好。

2.4.4 加标回收率实验 选择黔东南州三穗县枳椇子称取约0.15g，精密称定，依据重复性实验结果计算其理论含量选择适宜浓度对照品，以这些各元素本底值的 100% 作为加标量，精密加入各元素相应的标准溶液，参照“2.1”项下供试品溶液的制备方法，依据测定值与加入铅、镉、汞、砷、铜各对照品溶液的值计算平均回收率 RSD 值分别为92.9%、94.0%、86.2%、103.4%、102.0%，加样回收率符合实验要求。

2.4.5 样品测定 10批不同产地枳椇子样品按照2.1项下制备，测定不同产地样品中所含重金属含量见表3。

表3 10个产地5种元素的含量

3 讨论

枳椇子在贵州各地均有分布，为贵州习用药材，具有其功效主要为清热利尿、止渴除烦、解酒毒，主治酒病、烦热、口渴、呕吐、二便不利等症[1]，应用较为广泛。本实验采用微波消解法消解样品，ICP-MS法测定铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铜(Cu)5种重金属元素，对黔产枳椇子重金属含量测定进行了探索，结果重复性RSD%≤10.6%，精密度RSD%≤4.00%，回收率86.2%～103.4%。同时对贵州省10个产地枳椇子药材进行了检测，参照现行WM2-2001《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》、《中国药典》(2015年版)、GB - 14882 - 94《食品中放射性物质限制浓度标准》对黔产枳椇子安全性进行了评价，10个产地的枳椇子中5种重金属元素的残留量均低于限度值(Pb≤5.0 mg/kg，Cd≤0.3 mg/kg，Hg≤0.2 mg/kg，As≤2.0 mg/kg，Cu≤20.0 mg/kg)，10批药材铅、镉、砷3种重金元素含量均远低于限度值；铜元素低于限度值但总体均在限度值25%至40%范围内，含量波动不大；汞元素除样S5含量接近限度值外，其他批次均远低于限度值。S5样品采于贵州省安顺市东郊，汞元素含量较高，是否与城市土壤污染相关及相关性还有待研究。

4 结论

本文探索了枳椇子药材重金属测定方法及贵州不同产地枳椇子中5种重金属元素的含量，该方法准确、可靠、快捷，可操作性强，可以作为枳椇子药材重金属含量测定应用；课题组对贵州不同产地枳椇子药材的重金属进行了测定，综合评价了贵州枳椇子药材重金属残留情况，为该药材的安全性评价提供了基础数据支撑，就实验结果来看，黔产枳椇子受重金属污染影响较小，符合相关标准要求。