潘程程，李静，梁琦，赵梦璐，崔薇

(1山东中医药大学，济南253001；2山东中医药大学第二附属医院)

精子质量直接影响男性生育力，精子数量减少、活动力下降是精子质量降低的表现。特发性少、弱精子症作为男性不育的常见原因，病因复杂并缺乏有效的治疗手段。现代辅助生殖技术解决了一部分特发性少、弱精子症患者的生育难题，但因其价格昂贵、需多次就诊、安全性有待长时间随访观察，影响临床广泛应用。因此临床需要探索简便有效的治疗方法。生精散为山东中医药大学第二附属医院自制药，以五子衍宗丸为基础，有滋阴补阳、益精生髓之效，能提高精子活动力，改善精子质量[1]。电针即运用韩式治疗仪进行的经皮穴位电刺激治疗，由北京大学韩济生院士研发，用黏性皮肤电极代替针刺针，置于人体穴位皮肤上，通过电流刺激以治疗疾病，已广泛应用于生殖领域[2]。本研究通过生精散联合电针治疗特发性少、弱精子症，观察其治疗效果。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2017年10月～2018年6月山东中医药大学第二附属医院诊断为特发性少、弱精子症不育患者160例，均符合《世界卫生组织男性不育标准化检查与诊疗手册》及《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》中相关诊断标准，根据《中药新药临床研究指导原则》[3]确诊中医证型为肾虚精亏型。排除标准：①射精功能障碍，如不射精或逆行射精；②性传播疾病，如淋菌培养或支原体、衣原体检测为阳性；③睾丸质地、大小异常；④染色体G显带核型分析或Y染色体微缺失检查异常；⑤行精子运动轨迹分析前有高热史；⑥近期服用影响精子生成药物；⑦性轴检查异常；⑧精索静脉曲张；⑨有中药过敏史。剔除标准：①依从性差，不按剂量、时间服用药物；②服药期间存在持续发热；③服药期间使用其他生精药物、影响精子活力药物；④服药期间感染性传播疾病，如淋菌、支原体、衣原体感染；⑤服药期间进行生殖系统手术治疗；⑥因其他原因退出研究、失访或死亡。采用随机数字表法将患者分为电针组50例、生精散组50例及联合组60例。剔除脱落标本后，电针组48例、生精散组46例及联合组57例。电针组年龄(31.0±4.7)岁，不育年限(3.1±1.5)年；生精散组年龄(33.2±5.5)岁，不育年限(3.1±1.5)年；联合组年龄(32.2±5.7)岁，不育年限(2.8±1.3)年。三组年龄、不育年限比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各组均签署知情同意书。本研究经山东中医药大学第二附属医院医学伦理委员会审查批准。

1.2 治疗方法 电针组给予电针治疗。患者排空膀胱，取仰卧位，取穴：关元、足三里、肾俞、会阴。将200E型韩氏治疗仪(南京济生医疗科技有限公司)电极贴片(LT-1型)贴于相应穴位上，开机，频率2 Hz，强度15 mA。30 min/次，1次/d，15 d为1疗程，2个疗程为1个周期，各疗程间隔2～3 d，治疗3个周期。生精散组给予生精冲剂治疗，药物组成：鹿茸6 g、熟地20 g、枸杞子20 g、菟丝子20 g、车前子10 g、五味子10 g、覆盆子10 g、肉苁蓉15 g、巴戟天20 g、淫羊藿10 g、沉香9 g、鱼鳔9 g、砂仁6 g、茯苓10 g、三七9 g、山楂15 g。由山东中医药大学第二附属医院提供，开水冲服，2.3 g/次，3次/d，1个月为1个周期，服用3个周期。联合组给予电针及生精冲剂治疗，方法及疗程同其他两组。

1.3 疗效评价 参考《中药新药临床研究指导原则》[3]和《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》评价疗效。显效：治疗期间配偶怀孕，或经治疗后前向运动精子(PR)比例≥32%或精子活率>40%；有效：治疗后PR比例或精子活率较治疗前提高≥30%；无效：治疗后女方未怀孕或精子活率提高<30%，精子质量改善不明显。总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。

1.4 精液参数检测 三组禁止性生活2～7 d，用手淫法收集精液标本。用北京伟力精子微生物动静态图像检测分析系统(型号WLJY-9000)采用计算机辅助精子分析(CASA)系统检测PR比例、精子密度，用流式细胞仪采用SCSA系统检测精子DNA碎片率(DFI)，试剂购自浙江星博生物科技有限公司。

2 结果

2.1 三组临床疗效比较 电针组显效9例、有效18例、无效21例，总有效率为56.25%；生精散组显效8例、有效16例、无效22例，总有效率为52.17%；联合组显效15例、有效24例、无效18例，总有效率为68.42%。联合组总有效率高于电针组与生精散组(P均<0.05)，电针组与生精散组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 三组治疗前后精液参数比较 与治疗前比较，治疗后电针组与联合组PR比例、精子密度升高(P均<0.05)，DFI降低(P<0.05)；与治疗前比较，治疗后生精散组PR比例、精子密度升高(P均<0.05)，DFI降低，但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后电针组PR比例较生精散组高(P<0.05)，精子密度、DFI两组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗后联合组PR比例较电针组高(P<0.05)、DFI较电针组低(P<0.05)，精子密度两组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后联合组DFI较生精散组低(P<0.05)，PR比例、精子密度两组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。见表1。

表1 三组治疗前后精液参数比较

注：与本组治疗前比较，*P<0.05；与电针组同期比较，#P<0.05；与联合组同期比较，△P<0.05。

3 讨论

不育症发病率日益升高，成为世界性问题[4]。调查数据显示，在亚洲地区有15%的育龄夫妇不能生育，其中男方因素占50%[5]。而男性不育中有30%～40%的患者无法找到确切病因，称为特发性男性不育[6]。特发性少、弱精子症是男性不育的常见因素，目前缺乏明确的病因与有效的治疗手段[7]。本研究旨在通过生精散与电针联合治疗来提高特发性少、弱精子症患者的精子活力。

祖国传统医学认为，肾藏精，主生长发育与生殖，精液化生于肾，有赖于后天水谷精微的滋养，也有赖于经络、脏腑、气血的协调作用。同时，传统中医认为特发性少、弱精子症主要责之于肾，其中医病机主要以肾虚为主。因此，对于特发性少、弱精子症的中医治疗原则主要以温补肾阳、滋补肾阴、益精填髓为主。生精散为山东中医药大学第二附属医院按现代制作工艺制成的院内制剂，经过多年临床经验总结，具有滋阴补阳、益精生髓之效。并且通过大量临床观察发现，该药通过调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能以及内分泌的异常，提高精子活力，改善精子质量[1]。此方以五子衍宗丸(菟丝子、覆盆子、枸杞子、五味子、车前子)为基础，加入熟地、鹿茸、鱼鳔、淫羊藿、沉香、巴戟天、补骨脂等名贵中药材组成。五子衍宗丸是治疗男性不育症的经典方药，被历代医家所推崇，具有种嗣衍宗、填精生髓、补益肾气的功效。生精散方中诸药合用，阴阳双补，补而不滞，共奏滋阴温阳、益肾生精之效。因此，生精散可治疗肾虚精亏所致的男性不育症。

针刺作为提高妊娠率的一种辅助治疗手段被广泛应用于临床治疗。电针与传统针刺相比，无痛无创、操作更简单且更加方便安全[8,9]。治疗选穴：关元、足三里、肾俞、会阴。关元为任脉要穴，能够温阳固脱，补益正气，可治疗男性性功能障碍、阳痿、早泄、遗精、遗尿等男科病证；足三里是胃经的合穴，胃的下合穴，能够补肾益精，补虚扶正，可治疗虚劳诸证，也是治疗男科疾病的常用穴；肾俞穴归属足太阳膀胱经，能够补肾填精，强壮腰膝，常用于治疗遗尿、遗精、阳痿、早泄、尿路感染等泌尿生殖系统疾病；会阴穴为任脉要穴，沟通前、后二阴，能够扶正固脱，固摄冲任，善于治疗前后二阴及泌尿生殖系统疾病。

精子活力与精子密度是评估精子质量的重要指标。除精液参数明显异常外，男性精子DNA也可能出现异常，其中最常见的是DNA碎片，尤其在不育男性中常见[10]。DFI是指发生精子核DNA链断裂的精子占全部精子的百分比，能够有效评估精子DNA完整性[10]。DFI与精子浓度、精子活力显著相关，可作为精液质量评价的重要指标[11]。大量研究表明，不育男性与正常生育男性相比，精子DFI水平更高，精子DNA损伤与男性不育及妊娠率的降低有密切关系[12,13]。Colacurci等[14]认为，DFI达20%时，自然受孕机会下降，DFI达30%以上时，自然受孕的可能性接近零。王燕等[15]研究证实，DFI与男性年龄存在相关性，男性年龄越大，DFI越高，精子正常形态比例越低。因此，对DFI和精液参数的全面分析能有助于准确评估男性生育能力。

我们前期研究已证实生精散联合电针能够提高精子活力、增加精子密度[16]。本研究进一步证明生精散联合电针能够降低DFI，疗效优于单纯使用电针或生精散治疗，且未见明显不良反应。这可能是因为电针联合生精散能够有效减少精子核DNA的断裂，但其作用靶点与作用机制尚不明确。并且本研究样本量小，有待以后进一步研究。