轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)是介于正常老化与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)之间的一种临床过渡状态。据统计,每年10%～15%的MCI病人进展为AD[1],而同龄健康人群中仅为1%～2%[2]。因此,寻找MCI的精准生物学诊断标志物,对于筛选AD高危人群甚至进一步预防AD具有重大意义。

阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(AD7C-NTP)由神经细胞产生,是一种主要参与神经元萌发和细胞死亡的跨膜蛋白[3]。前期研究证实,AD7C-NTP在AD病人脑内神经原纤维缠结中大量存在,并在其脑内选择性表达增加,提示脑组织AD7C-NTP与AD的病理改变密切相关[4]。进一步研究发现,AD7C-NTP水平在AD与MCI病人脑组织、脑脊液及尿液中均有不同程度的升高[5-6],并且尿AD7C-NTP水平具有与脑脊液AD7C-NTP水平相似的诊断敏感度和特异度[7]。但相比于脑脊液检测的创伤性,尿液检测无创且更简便,容易在临床上推广。虽然尿AD7C-NTP对AD诊断价值已经越来越明确,但其对于MCI的诊断价值目前尚无系统的评价和分析。本研究旨在通过Meta分析系统评价尿AD7C-NTP水平对MCI的临床诊断价值。

1 资料与方法

1.1 文献检索 计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science 数据库、Ovid全文电子期刊、中国知网全文数据 (CNKI)、万方和维普等数据库。中文检索词:轻度认知功能障碍、阿尔茨海默病、尿AD7C-NTP。英文检索词:mild cognitive impairment, Alzheimer’s disease, Alzheimer-associated urine neuronal thread protein,AD7C-NTP, urinary。所有检索均截止至2017年8月。

1.2 文献纳入与排除标准

1.2.2 排除标准:(1)无法获取全文或原始数据,或提供的数据无法纳入研究;(2)文献类型属个案、综述、文摘或动物试验等基础研究。

1.3 文献质量评价、数据提取 两名评论者同时、独立完成文献质量评价,并对提取数据进行交叉核对,意见相佐时,经第三方共同探讨决定。参照QUADAS诊断性试验评价标准对纳入的各项研究完成文献质量评价[9-10]。参照提前制定的纳入和排除标准筛选文献,并对纳入的文献进行基本信息提取,包括纳入文献、发表时间、MCI组与HC组样本量、平均年龄和性别比、尿AD7C-NTP水平。

1.4 统计学方法 采用Stata12.0 版软件进行统计学分析。纳入的各项研究中尿AD7C-NTP浓度合并效应量采用标准均数差(standardized mean difference,SMD) 和95%置信区间(confience interval,CI)表示,P<0.05表示差异有统计学意义。异质性检验采用Q检验法,计算I2统计量并进行异质性分析。若I2≥50% 提示各研究间异质性显著,则采用随机效应模型;若I2<50% 提示各研究间同质性较好,则采用固定效应模型。同时采用漏斗图评估发表偏倚,并进行敏感性分析评估结果的可靠性。

2 结果

2.1 文献检索流程及纳入研究基本情况 文献基本检索流程见图1。 最终纳入10项研究[6,11-19],所有研究均提供了MCI组和HC组尿AD7C-NTP数据,其中有一项研究进一步提供了进展型认知功能障碍组(MCI-AD)和稳定型认知功能障碍组(MCI-S)与HC组尿AD7C-NTP数据[12]。总共2篇英文文献,8篇中文文献。10项研究基本信息提取结果见表1。

图1文献基本检索流程图

2.2 尿AD7C-NTP合并效应量 包括MCI-AD组、MCI-S组在内的所有MCI组尿AD7C-NTP水平明显高于HC组,异质性检验结果I2=96.1%,说明各项研究之间存在较大异质性,故采用随机效应模型进行分析。分析结果:MCI组与HC组尿AD7C-NTP合并效应量SMD=1.840,95%CI:1.134～2.547(Z=5.10,P<0.001)。说明MCI组尿AD7C-NTP浓度明显高于HC组,差异有统计学意义(见图2)。

2.3 发表偏倚分析 尿AD7C-NTP发表偏倚漏斗图对称,进一步Egger’s 检验,结果显示P=0.436,说明发表无偏倚，见图3。

表110项研究基本信息提取结果

注：MCI-AD为MCI病人进展为AD；MCI-S为稳定型MCI

图2MCI组与HC组尿AD7C-NTP浓度森林图

图3尿AD7C-NTP发表偏倚漏斗图

2.4 敏感性分析 依次单独剔除每项研究后,合并效应量仍无明显改变,说明Meta 分析敏感性较低,结果稳健。

3 讨论

AD是老年痴呆最常见类型,由于早期无症状或症状轻微不被引起重视,通常在病人中晚期才被诊断,导致干预延迟和干预效果不理想。因此AD的有效防治寄希望于早期识别。MCI属于AD前有症状临床阶段,此阶段脑组织已出现AD典型神经病理变化,被认为是AD前驱状态,因此早期识别MCI病人,可作为AD 防治的突破口。

AD病人脑内Tau蛋白过度磷酸化引起细胞骨架损伤时，会导致其脑内AD7c-NTP水平选择性增加。体外研究表明，AD7c-NTP在转染神经细胞的过度表达会促进神经炎发生和细胞死亡,提示AD7c-NTP的异常表达与AD神经变性相关,而MCI作为AD早期临床症状阶段,其脑内神经病理变化与AD类似。

本次Meta分析全面收集有关尿AD7C-NTP早期诊断MCI的文献，结果提示尿AD7C-NTP水平可以作为诊断MCI的一个重要生物学指标，但仍存在一定局限性。首先,本次Meta分析纳入尿AD7C-NTP水平对MCI诊断价值的研究存在较大的异质性,应该进行亚组分析或Meta回归分析以进一步探索异质性来源,但由于研究中相关数据不齐全(如病人性别、病人年龄及试验检测方法等),故未进行相关分析,亦尚未明确异质性来源。我们认为,由于各纳入研究人群地域、年龄、性别比例以及各研究检测方法不相同,可能会导致异质性存在。其次,提供灵敏度和特异度等相关数据的研究较少或者提供了部分相关数据但不齐全,因此本研究未能根据尿AD7C-NTP诊断MCI临界点统计出合并灵敏度、特异度等相关效应指标。第三,虽然进行了文献的全面检索,但最终只纳入了10项研究,样本量大小亦可能对结果产生一定的影响。再者,本研究文献检索局限于中英文2种语种,且纳入研究的质量参差不齐,可能会造成一定的潜在偏倚。因此,未来仍需加大更高质量的大样本多中心临床对照研究来评判尿AD7C-NTP对MCI的诊断效能,同时增加灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等效应指标作为评判指标,并且减少研究中性别、年龄等差异,统一检测方法,从而减少异质性来源。

综上所述,本研究结果提示尿AD7C-NTP检测可作为诊断MCI的一种简易手段,在临床是值得推广,但由于本次研究存在以上局限性,故上述结论仍需进一步试验加以证实。