赤羽病病毒N蛋白单克隆抗体的制备
2019-05-21王冰
王 冰
(黑龙江农垦职业学院,黑龙江 哈尔滨 151025)
赤羽病又名阿卡斑病(Akababe disease),是由布尼病毒科、布尼病毒属、辛波病毒群的赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)所引起的牛、绵羊和山羊的一种多形性传染病,以牛、羊的流产、早产、死产及先天性关节弯曲和积水性无脑症(Arthrogryposis Hydraencephaly,AH 综合症)为特征[1-2]。该病首次于1949年在日本群马县赤羽村发现,1959年才首次从该地采集的金色库蚊和三带缘库蚊体内分离到病毒,因此命名为 AKAV,此后澳大利亚、肯尼亚、南非、以色列、日本等地相继暴发该病[2-3]。我国科学家自1994年开始进行该病流行病学调查,至今已证实陕西、内蒙、湖南、河北、北京、上海、山东、安徽、吉林、甘肃、江苏、浙江、福建、湖北、广东等部分地区均有该病的流行[1]。目前,已经证实赤羽病广泛分布于澳大利亚、东南亚、亚洲东部、中东和非洲的热带和温带地区,主要由蚊虫、库蠓、螨类等节肢动物传播[1-3]。该病在我国被列为二类动物传染病,为重点检疫对象[3]。
AKAV 为单链负股RNA 病毒,其基因组由L(6 868 nt)、M (4 309 nt)、S (858 nt)3 个基因节段组成,分别编码 RNA 依赖的 RNA 聚合酶 L(L 节段)、囊膜糖蛋白 G1、G2、NSm (M 节段)和核衣壳蛋白 N、NSs (S 节段)[4]。N 蛋白作为补体结合反应的抗原,可以直接与体外转录的病毒S 节段RNA 结合以及与被感染细胞的细胞器结合而调节病毒的复制等特性[5-6]。N 蛋白为 AKAV 核蛋白,约 27 ku,氨基酸序列分析显示不同病毒株间N 蛋白相似性为97 %~100 %[6]。此外研究证实N 蛋白在病毒粒子与感染细胞中含量较多,可以作为诊断方法研究的有效靶抗原[6]。本实验利用原核表达系统表达、纯化AKAV N 蛋白并用其免疫小鼠制备单克隆抗体(MAb),为AKAV 检测方法的建立以及相关功能的研究奠定基础。……
