宋佳宇，李兴春，于文赫，吴百春

(1.石油石化污染物控制与处理国家重点实验室，北京 102206；2.中国石油集团安全环保技术研究院有限公司，北京 102206)

1 引言

随着石油石化行业的发展，土壤石油污染问题日益突出，石油污染物因具有结构稳定、不易降解、“三致”等[1]特点已成为影响土壤安全利用的重要因素之一。酶是具有生物催化活性的一类物质，石油降解酶类对土壤中有机物具有活化或抑制分解等作用[2]。近年来，酶修复技术已在石油污染修复领域得到广泛关注[3]。

漆酶(Laccase,EC 1.10.3.2)，又名酚酶、多酚氧化酶、漆酚氧化酶等，是一类含铜的糖蛋白氧化酶[4,5]，对酚及其衍生物[6]、芳胺及其衍生物[7]等污染物具有较强的催化效果。因其具有底物选择性广泛和稳定性好的优势，漆酶在环境污染修复领域[8,9]应用前景广阔。然而，漆酶大多属于胞内酶，提取效率极低，纯化成本较高，严重制约了其在实际污染治理中的应用[10～12]。

据此，本研究选取可胞外产漆酶的血红密孔菌Pycnoporus coccineus(PC)为产漆酶菌种，通过优化产漆酶培养基条件及培养环境条件，获取漆酶最佳液体发酵工艺参数，制备出高效石油降解粗酶制剂并开展原油降解效果评价，为漆酶制剂的工业化生产和现场应用提供技术参数。

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 产漆酶菌种

本研究所用的产漆酶菌种为血红密孔菌(Pycnoporus coccineus，PC)，取自日本某菌种保藏中心。

2.1.2 石油降解菌群

本研究所用石油降解菌群为本实验室保存的高效石油烃降解复配菌群[13]，由铜绿假……