明建松 ，王晓雪 ，杨梦晨 ，汤 可 ，袁玉华

（1.天津医科大学总医院检验科，天津300052；2.天津港口医院检验科，天津300456）

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常见的慢性并累及多个关节的自身免疫性疾病，它的发病机理是一种涉及到多种细胞、细胞因子和免疫活性物质的复杂过程，其发病机制尚不完全清楚。近几年发现microRNA参与免疫应答反应，可能在RA的疾病进展中发挥重要作用。前期实验发现，miR-145-5p在RA中与对照组骨关节炎（OA）滑膜组织和滑膜细胞相比，在RA外周血单个核细胞（PBMC）、滑膜组织和成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）中miR-145-5p水平显著增加[1]。通过调节ADAM17的表达，miR-145-5p调节RA-FLS的增殖、细胞周期进程和炎性细胞因子的表达；通过下调Ets-1，miR-145-5p模拟上调IL-17水平和基质金属蛋白酶MMP-3，MMP-9和MMP-13的表达。现结合胶原诱导的关节炎CIA小鼠模型，增强miR-145-5p表达，观察CIA小鼠关节变化情况，分析miR-145-5p在CIA中的作用。

1 材料和方法

1.1 材料 DBA/1小鼠36只，雄性，8周龄左右，SPF（Specefic Pathogen Free，无特定病原体）级，体质量（20±2）g，由北京华阜康公司提供，标准饲料喂养，自由饮水、饮食，适应性饲养7 d，进行实验。动物于天津医科大学总医院饲养。本研究经天津医科大学动物护理与使用委员会批准。

1.2 试剂 牛Ⅱ型胶原（液）及弗氏完全佐剂购于美国chondrex公司，agomiR-145-5p购于中国广东Ribobio公司，小鼠麻醉剂水合氯醛购于美国sigma公司。将冻干的牛II型胶原蛋白在4℃下在0.05 mol/L乙酸中过夜溶解，在弗氏完全佐剂中乳化至最终浓度为2 mg/mL。

1.3 CIA小鼠模型建立 取36只8周龄，雄性DBA/1小鼠，适应性饲养2～3 d之后，随机分组选出10只小鼠作为miRNA阴性对照（miR-NC）组，其余作为模型构建组，进行初次免疫。……