方炳雄，蔡勉珊，张俊贤，翁文婕，冯心乐，阮 杰，黄 娟* （广东省普宁市人民医院 .检验科， .儿科，广东普宁5500； .广东凯普生物科技有限公司，广东潮州50； .广东医科大学医学检验学院，广东东莞5808）

耳聋是临床上最常见的感觉性疾病，与遗传和多种环境因素(如医疗因素、环境暴露、创伤、药物等)有关。资料显示，全球范围内约 60%的耳聋患者与遗传因素有关[1-2]。在中国，每年先天性耳聋患儿出生率约为 0 .15%[3]，严重影响出生人口素质。因此新生儿听力筛查，已经作为一种快速诊断和干预的手段。我国的研究表明， 80%的遗传性耳聋是由GJB2、SLC26A4、线粒体 DNA、GJB3功能基因突变引起的[4]。本研究采用 PCR结合导流杂交技术对粤东地区出生新生儿的这 4种耳聋易感基因 13个突变位点进行检测分析，旨在了解本地区新生儿遗传性耳聋基因的突变情况，为预防与阻断耳聋患儿的发生提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取 2017年1月－2018年9月粤东地区出生的新生儿为研究对象，在家属知情同意情况下，自愿接受耳聋基因检测。入选对象中，揭阳市 695例，潮州市 609例，汕头市126例，共计检查1430例新生儿。

1.2 主要试剂与仪器

血液基因组 DNA提取试剂盒、耳聋易感基因检测试剂盒与医用核酸分子杂交仪和 PCR扩增仪均由广东凯普生物技术有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1DNA的提取 用含 E DTA-K3的真空采血管，采集新生儿静脉血 2.0～3.0 mL，或采用足跟采血，制作血斑卡。采用血液基因组 DNA提取试剂盒(离心柱型)，提取纯化 DNA。用紫外分光光度法检测 DNA质量浓度和纯度，确保 DNA质量浓度≥ 200 ng/L，纯度为 A 260/A280的比值在 1 .8～2.0，置于－ 20℃保存备用。……