张 晨，刘斯汝，阿依木古丽，霍生东，李囿蓉，何灵芝， 徐 硕，平新新，王翻兄，李佳佳

(西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730124)

口腔溃疡作为目前常发的内科疾病之一，给人们生活带来诸多不便和痛苦.发病时常见口腔内部大小不等的白色斑块，有灼烧感，当有异物接触时疼痛加剧.其病程最多可长达20天，发病周期短，平均每隔一月可发生一次甚至两次以上，有少数患者能在很短的2～3天内痊愈[1].有报道称,在此期间大量口服维生素C可以明显地缩短病程，减轻症状，但在多次使用后可产生耐药性[2].

目前，市面上常见的治疗口腔溃疡的药物有西地碘片、冰硼散、西瓜霜等.部分患者表示效果良好，但仍有许多患者表示使用效果并不理想.目前，西医对于该病的发生认为是机体自身免疫系统异常所致，但具体发病机制尚未明确[3].而中医常称口腔溃疡为口疮，其发病有多方面原因，常见的有阴虚火旺、脾胃湿寒以及心火亢盛等[4].近几年随着生活水平的提高以及生活压力的增大，人们多暴饮暴食，贪饮贪凉，多数人均存在不同程度的脾胃虚寒症候[5].该症候引发的口腔溃疡常常迁延不愈，且各种市售药物疗效不明显.现代药理研究表明，黄芪与甘草组合对于各种溃疡愈合、肌肉收敛等有着非常显著的疗效.因此，实验以两种目前常见的口腔溃疡类型的动物模型为基础，探究甘草加黄芪组合在口腔溃疡治疗中的效果.

1 材料与方法

1.1 试验材料

KM昆明雄性小鼠500只(50日龄)由申联生物医药公司提供、75%酒精(500 mL)、乙醚(500 mL)、0.9%生理盐水250 mL、石炭酸(200 mL)由天津大茂化学试剂公司提供；大黄50 g、芒硝50 g、厚朴50 g、枳实50 g、附子50 g、肉桂50 g、仙茅50 g、黄芪粉500 g、甘草粉500 g，由兰州陇源中药材有限公司提供；冰硼散(25 g)、六味地黄丸(360丸一瓶)、香砂六君丸(250丸一盒)，由甘肃德生堂医药提供；6 mm棉球、游标卡尺、1 mL注射器、小鼠灌胃针、微量喷口瓶(0.5g/20g)、镊子、烧杯若干.

1.2 试验方法

1.2.1 肾阴虚动物模型的制备

试验原理为使用大量温热性的药材，造成阴虚阳盛的失平衡状态，为诱发阴虚火旺型口腔溃疡做基础.具体方法为：附子30 g、肉桂20 g、仙茅20 g，500 mL水熬制成250 mL，过滤备用.取小鼠100只，每只一次灌胃1 mL，一日一次，直到小鼠出现：进食减少、饮水增多、舌红、体重下降、精神不振、活动减少、焦躁不安、大便干燥、小便黄赤，说明造模成功[6].

1.2.2 造模反证

原理为肾阴虚动物在六味地黄丸的治疗下可迅速收到转归效果.随机取造模完成的小鼠，经口给予六味地黄丸，每次5丸，一日一次，观察是否有肾阴虚症状消失的现象.

1.2.3 脾阳虚动物模型的制备

试验原理为使用大量性寒、破气耗气的寒凉药物，导致脾胃虚弱寒凉，为诱发脾胃湿寒型口腔溃疡做基础.具体方法为：大黄15 g、芒硝15 g、厚朴10 g、枳实8 g，组成大承气汤， 500 mL水熬制成250 mL，过滤备用.取小鼠100只，每只一次灌胃1 mL，一日一次，直到小鼠出现：嗜睡无力、大便稀软、毛焦体瘦、舌白、口唇多涎，说明造模成功[7].

1.2.4 造模反证

造模反证原理为脾阳虚动物可在香砂六君丸的治疗下迅速转归.随机取造模完成的小鼠，经口给予香砂六君丸，每次5丸，一日一次，观察是否有脾阳虚症状消失的现象.

1.2.5 口腔溃疡模型的制备

对照组中，20例患者的年龄范围为26～41岁，年龄均值为（33.02±3.55）岁，其子宫肌瘤直径范围为 4.0～11.0 cm，均值为（6.20±1.33）cm，其中 14 例患者为单发肌瘤，6例患者为多发肌瘤。

各组小鼠经过乙醚麻醉后，用6 mm直径大小棉球蘸取充足的石炭酸，在口腔左嘴角黏膜处灼烧30 s，次日可见6 mm大小直径的红白色损伤，表现为红肿潮湿[8].在该损伤的基础上可根据小鼠的体质诱发不同类型的口腔溃疡，实验以口腔黏膜损伤后3日为标准，观察烧伤伤口是否转化为中央凹陷并覆以白色伪膜、有光泽感、四周红润、疼痛反应强烈的白斑，可判定为溃疡，否则重新造模.

1.2.6 甘黄疗法外用效果研究

1) 治疗药物的制备.甘草粉(500 g)、黄芪粉(500 g)、甘草∶黄芪1∶1(500 g)、甘草∶黄芪1∶2(500 g)、甘草∶黄芪2∶1(500 g)、冰硼散(市售500 g).将上述药物装入专用喷口瓶备用(每喷0.5 g).

2) 试验分组.取肾阴虚口腔溃疡模型小鼠63只，每9只一组，共7组，分别为：甘草组、黄芪组、甘黄1∶1组、甘黄1∶2组、甘黄2∶1组、冰硼散组、对照组(不治疗).

另取脾阳虚口腔溃疡模型小鼠63只，分组方式同上.治疗组使用各组对应药物，每日一次，每次一喷(0.5 g)，每天测量各组小鼠口腔溃疡直径大小做统计分析，取得最佳适应症以及药物配比组合.

经以上试验所取得的甘黄药物最佳比例以及适应症，并在此基础上进行口服效果验证.取适应症小鼠27只，每组9只，分别设置：口服不外用、口服加外用、外用不口服，共三组.口服剂量参照李仁军[9]等人对小鼠口服黄芪多糖的研究中的剂量.口服组小鼠每只使用黄芪粉0.5 g溶于1 mL生理盐水灌胃(实验前各组用生理盐水灌胃3日，以消除应激反应)，外用组小鼠每只灌入等量生理盐水.每天测量各组小鼠口腔溃疡直径大小做统计分析.

3)治疗时间及治疗结果判定标准.各组小鼠在口腔溃疡确认判定后，即口腔溃疡成形后持续3日无明显肉眼可见的变化后，开始治疗.以小鼠溃疡损伤面直径缩小至1 mm以下且无明显的疼痛反应、病灶与周边组织无明显界限为痊愈标准.

2 试验结果

2.1 各型口腔溃疡治疗效果

表1肾阴虚小鼠各治疗组效果(单位：mm)

表2脾阳虚小鼠各治疗组效果(单位：mm)

图1肾阴虚小鼠各治疗组效果图2脾阳虚小鼠治疗组效果

实验结果表明，肾阴虚型口腔溃疡小鼠在利用不同药物治疗时效果差异较大，其中单用甘草黄芪两味药物时，溃疡在4日开始逐步缩小，10日左右基本消失，较对照组而言推迟2至3日愈合，疗效不佳.甘草黄芪组合使用时第二日起溃疡面积扩大，7日左右逐步缩小，10日后基本痊愈.对比对照组发现，组合药物可使得溃疡面积扩大、病程延长.相反，在使用冰硼散治疗时可收到较为满意的疗效，用药后2日溃疡开始逐步缩小，7日基本痊愈.

脾阳虚口腔溃疡小鼠在单用甘草、黄芪两味中药时疗效基本相当，4日起对应组的小鼠表现为明显转归，9日左右基本痊愈.而在组合使用两者药物时疗效有了明显的提升，三种组合均在用药后5日痊愈，且甘草黄芪1∶2时效果最佳.而冰硼散对该型口腔溃疡基本无治疗作用， 甚至可在一定程度上加重病情.

综上所述，甘黄疗法对于肾阴虚所引发的口腔溃疡疗效远不及冰硼散，而对于脾阳虚所致的口腔溃疡，在外用甘草、黄芪时可以收到非常满意的治疗效果，尤其在组合使用时效果更加明显.其中甘草黄芪比例为1∶2时，伤口愈合速度最快、病程显著缩短，而冰硼散对于此类型溃疡基本无效.总而言之，甘黄疗法的适应症为脾阳虚所致的口腔溃疡，最佳组合比例甘草∶黄芪为1∶2.

2.2 口服与外用效果验证结果

表3口服与外用效果验证结果

图3 口服与外用效果验证结果

实验数据表明，单纯使用甘黄外用效果与之前实验结果基本相同，口服组较另外两组而言效果较差，而C组表现出非常优秀的治疗效果,用药2日起伤口有了较大幅度的缩小,4日基本痊愈.由此可以发现，甘黄疗法除使用1∶2甘黄外，另内服一定数量的黄芪，可加速小鼠溃疡的愈合.除此之外,任何的单用效果均不如结合用药效果显著.

3 分析讨论

口腔溃疡原因众多，中医角度而言常见的有阴虚火旺和脾胃湿寒两种类型.其中以脾胃湿寒最为常见.中医认为，人生活于世无外乎阴阳，表现在各个器官也是同样的道理，肾中有阴有阳，在正常情况下阴阳合抱、互根互用、此消彼长、相互制约.而当在一些致病条件下，如纵欲过度、大热伤津等均可以造成肾阴损伤.肾阴消耗以致阴损不能制阳，患者表现为口舌生疮、腰膝酸软、脉象细数等[10].此类型溃疡便是阴虚火旺型溃疡.此时病的实质在于肾阴虚而阳气盛，若使用甘草、黄芪等药物性热温补，归肝脾经，一经使用可加剧机体阴液损耗，进而使得病情更加严重.冰硼散等药物性寒凉，能清热解毒、消肿止痛[11]，可以迅速达到治标的效果，而本质仍需内服六味地黄丸等补肾阴的药物引火归元，达到治根本的效果.

脾胃湿寒型口腔溃疡为近几年多发类型.冰硼散性寒凉，使用此药物治疗无异于雪上加霜.黄芪补气固表可以补正气抵外邪，同时可以敛疮生肌加快伤口愈合等.甘草主温补脾胃、清热解毒，引药入经，以调和黄芪药性，加强药物的疗效.两药合用时可最大程度地发挥药效.但研究表明，黄芪补气固表的作用在内服时才能发挥最佳效果[12].试验数据结果也支持此结论.

综上，在小鼠口腔溃疡的病例中，甘草黄芪的治疗方法，仅适用于脾胃湿寒所导致的口腔溃疡，而在甘草黄芪1∶2比例时外敷且配合黄芪粉内服时可达到最佳疗效.