罗剑 王媛媛 李爱玲 冯华君 许胜恩 赵冲 覃纲

1西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科（四川泸州646000）；2西南医科大学循证医学中心（四川泸州646000）

尽管癌症领域研究不断取得进步，但其临床结果仍然很差，主要原因之一是缺乏有效的生物标志物来对癌症做出早期诊断和预后评价，故寻找具有潜力的癌症患者诊断和预后的生物标志物显得尤为必要。长链非编码RNA（long non⁃coding RNA，lncRNA）是长度＞200个核苷酸的一类转录物，具有有限的蛋白编码能力［1］。越来越多的研究表明lncRNA参与了很多肿瘤发生的生物过程，包括增殖、转移和凋亡［2］。位于第10q26染色体上的lncRNA癌易感性候选基因2（cancer susceptibili⁃ty candidate 2，CASC2）最初在子宫内膜癌中被发现［3］。ZHAO 等［4］发现低表达的 CASC2可通过调节miR⁃362⁃5p/NF⁃κB轴从而促进肝癌细胞的侵袭和转移；XIONG等［5］发现在甲状腺癌中CASC2的低表达与更高的TNM分期呈显著的相关性；ZHOU等［6］也发现在胃癌中CASC2的低表达与远处转移、更高的TNM分期和血管侵袭呈显著的相关性，提示CASC2低表达可能会影响癌症患者的生存情况。故本研究对已检索到的全部相关文献进行系统评价，以探究CASC2的表达情况与恶性肿瘤患者预后的关系。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 研究类型探究癌症患者CASC2异常表达与其预后相关性的病例⁃对照研究。

1.1.2 研究对象均经过组织病理学确诊的肿瘤患者，且所有病例均具有详细的临床病理资料。

1.1.3 暴露因素CASC2的低表达为暴露因素，结果判读根据原始文献临界值区分。采用qRT⁃PCR法检测CASC2的表达情况。

1.1.4 结局指标（1）临床特征：主要包括淋巴结转移、远处转移、TNM分期；（2）总生存期。

1.1.5 排除标准（1）重复发表的文献；（2）研究与癌症或CASC2无关；（3）动物研究；（4）缺乏列入纳入研究标准的数据；（5）评论或摘要。

1.2 文献检索策略计算机检索PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、OVID、中国知网、万方和维普等数据库，搜索关于CASC2异常表达与肿瘤患者预后相关性的文献，截止时间为2018年5月9日。英文检索词：long non⁃coding RNA、lncRNA、lincRNA、CASC2、cancer susceptibility can⁃didate 2、tumor、cancer、carcinoma、neoplasms。中文检索词：长链非编码RNA、CASC2、癌易感性候选基因2、肿瘤、恶性肿瘤、癌等。该策略在不同的数据库中进行了调整，以最大限度地检索更多原始文献。此外，进行手工检索专业期刊，以补充获取相关文献。

1.3 文献筛选与资料提取由2位研究员独立提取并检查所选原始文献的数据。评估意见分歧通过与第3位研究员达成共识来解决。资料提取内容主要包括：（1）纳入研究的基本信息，包括研究题目、第一作者和发表时间等；（2）纳入研究的基线特征，包括肿瘤类型、患者性别、样本数、CASC2表达水平及检验方法；（3）结局指标：淋巴结转移、远处转移、TNM分期及总生存期等，从文中直接提取或运用Engauge Digitizer5.1软件从生存曲线上获取所需数据，通过计算获得总生存期的风险比（hazard ratio，HR）；（4）偏倚风险评价的关键要素。

1.4 纳入研究的偏倚风险评价采用纽卡斯尔⁃渥太华量表（Newcastle⁃Ottawa scale，NOS）［7］对纳入研究的偏倚风险进行评价。包括研究对象的选择，设计分析中的可比性，暴露及结局情况。由2名研究员独立进行风险偏倚评价，对存在的意见和分歧由第3名研究员评价解决。评分≥7分，则认为质量较高。

1.5 统计学方法统计分析采用RevMan 5.2软件进行。通过Q和I2测试来测量不同研究之间的异质性。I2≥50%的概率值和P＜0.1表明存在显著的异质性，基于异质性分析的结果选择随机效应模型或固定效应模型。如果研究之间存在显着的异质性，则使用随机效应模型，否则使用固定效应模型。使用比值比（odds ratio，OR）作为汇总统计来分析二分类数据。通过汇集HR与其相应的95%CI分析CASC2与癌症患者存活之间的关联。P＜0.05说明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 文献筛选流程及结果检索英文数据库初次共获得93篇文献；检索中文数据库初次获得13篇文献。通过阅读题目、摘要进行初筛，再通读全文进行复筛，最终纳入 13 篇符合条件的文献［4⁃6，8⁃17］，文献筛选流程见图1。所检索的数据库及检出文献数具体如下：PubMed（n＝34）、Web of Science（n＝29）、Embase（n＝29）、The Cochrane Library（n＝0）、OVID（n＝0）、中国知网（n＝3）、万方（n＝8）、维普（n＝2）。

图1 文献检索及筛选流程图Fig.1 Flow chart of document search and screening

2.2 纳入研究的基本特征和偏倚风险评价结果纳入研究均分为CASC2高表达组和低表达组。预后共纳入13项研究，共923例患者。13项研究均来自中国。纳入研究的基本特征及风险偏倚评价结果见表1。

2.3 Meta分析结果

2.3.1 CASC2表达与淋巴结转移的相关性共5个研究［5，9，13⁃15］报告了发生淋巴结转移组和未发生淋巴结转移组患者中CASC2的表达情况。固定效应模型Meta分析结果显示，发生淋巴结转移组患者中CASC2的表达与无淋巴结转移组患者中CASC2的表达差异无统计学意义（OR＝0.76，95%CI＝0.48～1.20）（图2）。

表1 纳入研究的基本特征Tab.1 Basic characteristics of the studies

图2 描述CASC2表达与患者淋巴结转移相关性的森林图Fig.2 Forest plot of the correlation between CASC2 expression and lymph node metastasis in patients

2.3.2 CASC2表达与远处转移的相关性共4个研究［5⁃6，13，16］报告了发生远处转移组和未远处转移组患者中CASC2的表达情况。固定效应模型Meta分析结果显示，发生远处转移组患者中CASC2的表达与未发生远处转移组患者中CASC2的表达差异无统计学意义（OR＝0.74，95%CI＝0.42～1.32）（图3）。

2.3.3 CASC2表达与TNM分期的相关性共12个研究［4⁃6，8⁃16］报告了 TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期患者中CASC2的表达情况。固定效应模型Meta分析结果显示，Ⅲ～Ⅳ期组患者中CASC2的表达低于Ⅰ～Ⅱ期组，其差异有统计学意义（OR＝0.31，95%CI＝0.23～0.4）（图4）。

2.3.4 CASC2表达与总生存期的相关性共11个研究［4⁃6，8，10⁃12，14⁃17］提供了患者的总生存期。固定效应模型Meta分析结果显示：与CASC2高表达组相比，CASC2低表达组患者的总生存期更短，差异有统计学意义（HR＝0.46，95%CI＝0.37～0.58）（图5）。

3 讨论

研究发现lncRNAs参与癌细胞各种信号通路的转导，在肿瘤的发生、发展、侵袭和转移中起着重要作用［18］。大量研究表明lncRNAs的异常表达与癌症患者的预后相关，如肝癌高表达转录本［19］和HOX转录反义RNA［20］等被认为是预测人类癌症不良预后的新型生物标志物。

图3 描述CASC2表达与患者远处转移相关性的森林图Fig.3 Forest plot of the correlation between CASC2 expression and distant metastasis in patients

图4 描述CASC2表达与TNM分期相关性的森林图Fig.4 Forest plot of the correlation between CASC2 expression and TNM staging

图5 描述CASC2表达与总生存期相关性的森林图Fig.5 Forest plot of the correlation between CASC2 expression and overall survival time

很多研究表明CASC2在各种肿瘤的发生中扮演着抑癌基因的角色。CHEN等［17］发现低表达的CASC2可调节高迁移率族蛋白A2的表达从而促进垂体腺瘤细胞的增值和侵袭，抑制其凋亡。来自于WANG等［12］的研究表明CASC2表达降低时促进上皮间质转化从而增强肝癌细胞的侵袭和转移。然而，WANG等［14］发现过表达的CASC2通过调节性别决定区Y框蛋白4从而抑制肺腺癌细胞的侵袭、转移及上皮间皮转化。LIAO等［10］发现过表达的CASC2通过抑制Wnt/β⁃catenin信号通路从而抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。基于上述有关CASC2研究的结果，推测CASC2在癌症患者中可能具有潜在的预后价值。但CASC2作为人类癌症分子生物标志物的作用尚不清楚。

本研究利用Meta分析探讨了CASC2在癌症患者预后评估中的价值，发现CASC2的低表达与患者淋巴结转移和远处转移均无关。低表达的CASC2与较晚的TNM分期存在显著相关性，且CASC2的表达还与癌症患者总生存期存在显著正相关，提示CASC2可能是评估癌症患者预后的潜在生物标志物，临床上医生应该更多地关注CASC2低表达的癌症患者。

应该承认本研究存在一些局限性：（1）所有纳入的研究均来自中国，因此所获数据可能缺乏全球推断；（2）癌症的类型和数量较少；（3）不同研究的低表达标准各不相同。

综上，本研究提示CASC2的低表达与较晚的TNM分期和较短的总生存期有关，CASC2低表达可能是癌症患者不良预后的危险因素。受纳入研究的总样本数量、文献质量和地域的影响，尚需开展更为高质量的研究予以验证上述结论。