周伟杰， 王 声， 夏书官， 田艳艳， 左永刚， 李 玥， 户 庄

(河南大学淮河医院乳腺甲状腺外科， 河南 开封 475000)

乳腺癌是一种严重威胁女性健康的恶性肿瘤，近年来其发病率逐渐上升并趋于年轻化。乳腺癌患者发生全身转移是导致其死亡率较高的主要原因，也是目前乳腺癌治疗的重点和难点[1-3]。白细胞介素6(interleukin-6，IL-6)是目前发现的具有多种功能的细胞因子，可由机体中多种细胞分泌，参与机体免疫反应、炎症调节和肿瘤的发生发展过程[4-6]。近年来的研究发现，IL-6在乳腺癌患者血清中表达量显著上调，并与患者预后等指标显著相关，对乳腺癌的进展具有重要作用[7]。本研究旨在通过小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术沉默乳腺癌MCF-7细胞中IL-6基因的表达，观察IL-6对乳腺癌细胞生长、迁移和侵袭能力的影响。

材 料 和 方 法

1 实验主要试剂和仪器

人乳腺癌细胞株MCF-7购自ATCC；RPMI-1640培养基购自HyClone；Lipofectamine 2000、TRIzol、逆转录试剂盒和qPCR试剂盒购自Invitrogen；鼠抗波形蛋白(vimentin)抗体和鼠抗上皮钙黏蛋白(E-cadherin)抗体购自Dako；鼠抗神经钙黏蛋白(N-cadhe-rin)抗体、抗基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotei-nase-2，MMP-2)抗体、抗基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9， MMP-9)抗体购自Abcam；鼠抗β-肌动蛋白(β-actin)抗体和辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG抗体购自北京中杉金桥公司；兔抗信号转导及转录激活因子3 (signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)抗体和兔抗p-STAT3抗体购自Cell Singaling Technology；MTT、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)和Matrigel购自Sigma。CO2细胞培养箱购自Forma；荧光定量PCR仪购自ABI；酶标仪购自Thermo；凝胶成像系统购自Bio-Rad。

2 实验方法

2.1细胞的培养 MCF-7细胞采用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养，并加入1×105U/L的青霉素和100 mg/L链霉素，常规放入37 ℃、5% CO2的细胞培养箱中，其浓度达到90%，加入0.25%胰酶消化进行传代。……