谭 洁， 田 霞， 韩 峥， 朱庆曦， 刘 蒙

(武汉大学同仁医院， 武汉市第三医院， 湖北 武汉 430060)

肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSC)是存在于肝脏窦周狄氏间隙中的维生素A存储细胞。HSC和转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)在肝纤维化发病过程中扮演重要的角色[1]。多种因素引起的肝损伤都可能激活HSC，而活化的HSC可释放多种促进纤维化进程的细胞因子，进而转变为肌成纤维细胞(myofibroblast，MFB)[2-5]。研究表明， TGF-β对肝纤维化的调控主要是通过TGF-β/Smad信号通路实现，活化的TGF-β可激活TGF-β/Smad信号通路，进而促进HSC合成胶原和纤维连接蛋白等细胞外基质(extracellular matrix，ECM)，从而加速肝纤维化的发生。

微小RNA-29(microRNA-29,miR-29)是新近发现的一个与纤维化疾病密切相关的小分子RNA[6]。研究表明 miR-29b在肝纤维化小鼠和进展性肝纤维化患者肝脏组织中的表达明显下降[7-10]，且可抑制多种胶原蛋白的表达[11]，这提示miR-29b在肝纤维化的进程中发挥了重要作用，且很可能具有强大的抗纤维化潜能。此外miR-29还可通过抑制TGF-β/smad信号通路介导上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)和致纤维化过程，在多种器官纤维化中起着重要的作用。

本研究通过检测活化的HSC及肝纤维化动物模型获取的HSC中miR-29b、TGF-β/Smad信号通路相关蛋白和肝纤维化标志蛋白的水平变化，研究它们与HSC活化程度和肝纤维化的关联性，后通过进一步鉴定miR-29b对TGF-β1的直接靶向结合，探讨肝纤维化过程中miR-29b对TGF-β/Smad信号通路的调控作用，为进一步研究抗肝纤维化提供新的思路。

材 料 和 方 法

1 实验动物和主要试剂

14～16月龄雄性Wistar 大鼠12只，体重400～600 g，购自湖北省医学动物实验中心，合格证编号为No.42000600016665。TRIzol RT RNA(MRC)；Eastep RT Master Mix Kit(Promega)；SYBR Premix Ex Taq(TaKaRa)，引物由TaKaRa公司设计；……