超声波提取甘薯叶多糖抗氧化性研究
2018-12-27周宏
周 宏
(内蒙古民族大学 化学化工学院 内蒙古 通辽 028043)
超声波提取甘薯叶多糖抗氧化性研究
周 宏
(内蒙古民族大学 化学化工学院 内蒙古 通辽 028043)
目的:研究甘薯叶多糖清除氧自由基的能力。方法:采用比色法研究甘薯叶多糖清除氧自由基的能力。结果:甘薯叶多糖对•OH和O2-自由基有较强的清除作用,甘薯叶多糖对•OH清除率达到50%所需浓度为0.61mg/mL,同样条件下甘露醇•OH清除率达到50%所需浓度为0.72mg/mL;甘薯叶多糖对O2-清除率达到50%所需浓度为0.46mg/mL,同样条件下抗坏血酸O2-清除率达到50%所需浓度0.56mg/mL。结论:甘薯叶多糖清除•OH自由基能力较对照品甘露醇强,清除O2-自由基能力较对照品抗坏血酸弱,并且浓度与清除率呈正相关。
抗氧化活性;甘薯叶;超声波提取
1 引言
甘薯又名甜薯、红薯、地瓜,旋花科一年生草质藤本。原产地是美州热带地区,16世纪末传入我国,目前我国已经成为世界最大甘薯生产国。甘薯营养丰富,富含淀粉、糖类、蛋白质、维生素以及各种氨基酸。甘薯可以入药,性味甘平、无毒,可补脾胃、养心神、益气力、除宿瘀脏毒[1]。近年来,甘薯叶在一些地区成为一种新型蔬菜。有研究表明甘薯叶具有增强免疫力、促进新陈代谢、抗氧化等医疗保健功效。
本文通过超声波辅助提取甘薯叶中的多糖成分,用分光光度法对其抗氧化活性做了初步的分析。旨分析其抗氧化性能力,并寻求新的处理、应用方法,提高甘薯叶的应用价值。
2 实验部分
2.1 仪器和试药
TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);Millipak-20 Express过滤器(密理博);JP300G型超声波提取仪;DHG-9070型电热恒温干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。
番红花红T(生化试剂),无水乙醇,NBT(生化试剂),EDTA-2Na,硫酸亚铁铵,Tris,亚硝酸钠,柠檬酸钠,邻苯三酚,盐酸,抗坏血酸,甘露醇,超纯水,甘薯叶(通辽本地产)。
2.2 实验方法
2.2.1 甘薯叶多糖类物质的提取 取烘干粉碎后的甘薯叶粉末,按液料比1:40用超纯水充分浸湿,设定频率20KHZ、功率选择500W、温度60℃条件下提取40min,浸取三次后合并、蒸发、浓缩滤液。冷却后用无水乙醇稀释静置24h,滤出沉淀,干燥后得多糖粗产品。将粗多糖溶解后透析,用无水乙醇重新沉淀,过滤干燥得待测多糖样品,配制成标准多糖溶液待测。
2.2.2 清除羟自由基(•OH)能力测定 取PBS缓冲溶液1.50mL,依次加入2.0mmol/L的EDTA-Na-Fe(Ⅱ)溶液0.70mL,520µg/mL的番红花红T溶液0.20mL,加入不同浓度的多糖试样1.00mL。6%的H2O2溶液0.40mL,用超纯水定容至5.00mL。混合均匀后在37℃水浴中保温30min。在波长520nm处,用分光光度计测其吸光度A。
清除率E%=(A样品-A空白)/(A对照-A空白)×100%
2.2.3 清除超氧阴离子(O2-)能力测定 比色管中加入50mmol/L的Tris-HCl(pH=8.2)溶液2.5mL,在25℃水浴20min后,加入不同浓度的多糖溶液2.0mL,0.2%NBT溶液0.50mL,10.0mmol/L的邻苯三酚0.50mL。加入超纯水定容至10.0mL在25℃水浴5min后,立刻用1D浓盐酸终止反应。选定波长为530nm,测量其吸光度A。
3 实验结果
3.1 羟自由基(•OH)的清除率
用1.00mL超纯水代替多糖溶液做空白,用1.70mL超纯水代替多糖溶液和EDTA-Na-Fe(Ⅱ)溶液做对照。同时以甘露醇代替多糖重复上述实验,具体结果见表1。
3.2 超氧阴离子(O2-)的清除率
用2.00ml超纯水代替多糖溶液做空白,同时以抗坏血酸代替多糖重复上述实验,具体结果见表2。
表1 甘薯叶多糖及甘露醇对•OH的清除作用
表2 甘薯叶多糖及抗坏血酸对O2-•的清除作用
4 讨论
通过表1、表2可知甘薯叶多糖对•OH清除率达到50%的浓度IC50为0.61mg/mL,相同条件下对照品甘露醇的清除率达到50%时所需浓度IC50为0.72mg/mL。甘薯叶多糖对O2-清除率达到50%的浓度IC50为0.46mg/mL,同样条件下对照品抗坏血酸清除率达到50%所需浓度IC50为0.56mg/mL。说明甘薯叶多糖的清除•OH和O2-的能力均较对照品甘露醇和抗坏血酸强。
甘薯叶多糖的浓度对•OH和O2-自由基的清除率呈正相关。
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会•中国药典(一部)[S]•北京:化学工业出版社, 2005: 235.
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TS255.1 【文献标识码】A 【文章编号】1009-5624(2018)01-0195-02
周宏(1980-),男,汉族,辽宁省绥中县人,硕士研究生,内蒙古民族大学,化学化工学院,讲师,研究方向:材料制备合成或有机物提取。