郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州市儿童医院（450000）褚苗

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年2月～2017年12月我院疑似IM患儿274例，男158例，女116例，年龄1～9岁，平均（5.66±2.07）岁；本研究经我院医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法 外周血细胞形态学检查：以EDTA-K2抗凝管采静脉血1ml，颠倒3～6次，混匀，血涂片2～3张，瑞氏-姬姆萨染液染色，油镜镜检。由细胞学专业、技术娴熟的专业检测医师阅片。阳性：异型淋巴细胞＞10%。定量PCR技术分析：抽取静脉血，以EDTA-K2抗凝处理，采取TaqMan荧光标记探针基因扩增技术测定，探针序列：FPEBV5X-CCTCGGACAGCTCCTAAGAAGGCACC-Y3’，26bp；引物序列：PQEBVF5，_AAGC-CCAACACTCCACCAC-3’，19bp；PQEBVR5’-CTGGTAGGACT-GGGCGAC-3’，18bp。PCR扩增条件：93℃，2min，预变性；93℃，45s，55℃，60s，共10个循环。最后93℃，30s；55℃，45s，共30个循环。阳性：EB-DNA定量＞1.0×103copy/ml。

附表 检测结果[n(%)]

1.3 观察指标 ①分析单独检测与联合检测结果。②比较单独检测与联合检测灵敏度、准确度及特异度。

1.4 统计学处理 通过SPSS21.0处理数据，计数资料（特异度、灵敏度、准确度）以n（%）表示，行χ2检测，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检测情况 本研究疑似274例IM患儿经实验室病理学确诊98例。外周血细胞形态学检查检出真阳性55例，真阴性158例；定量PCR技术检出真阳性61例，真阴性163例；外周血细胞形态学检查联合定量PCR技术检出真阳性97例，真阴性157例。

2.2 检测结果 联合检测准确度92.70%、灵敏度98.98%高于外周血细胞形态学检查（77.74%、56.12%）、定量PCR技术（81.75%、62.24%）单独检测，差异有统计学意义（P＜0.05），联合检测特异度与单独诊断对比，差异无统计学意义（P＞0.05），见附表。

3 讨论

IM能通过血液、唾液传播，并长期潜伏于机体淋巴组织中，正常情况下与机体相安无事，若免疫功能低下，EB病毒便活化形成感染，诱发不同程度疾病[1]。异型淋巴细胞的生成多是因为B淋巴细胞受体与病毒结合后于持续复制及增殖的过程中被T淋巴细胞识别，诱发细胞毒性效应。于循环血液中受刺激后增殖的T淋巴细胞产生形态变异，与正常的T淋巴细胞形态差异显著。本研究中行外周血细胞形态学检查检出真阳性55例，真阴性158例，准确度77.74%、灵敏度仅56.12%，漏诊率较高。定量PCR技术重复性好、操作简单，能一步完成扩增及产物的检测，准确地反映病毒感染及复制情况。本研究中采用定量PCR技术检出真阳性61例，真阴性163例，准确度81.75%、灵敏度62.24%，虽略高于外周血细胞形态学检查，但经统计学计算无显著差异（P＞0.05）。肖波等[2]采用外周血细胞形态学检查联合EBV-DNA定量分析对212例IM患儿实施检测检出阳性190例，显著高于单独检测。本研究中对274例疑似IM患儿采用外周血细胞形态学检查联合定量PCR技术检测，检出真阳性97例，真阴性157例，准确度92.70%、灵敏度高达98.98%，远高于单独检测（P＜0.05），提示联合检测可提高检测准确度、灵敏度。