张少华，王君实，董维鹏，燕炯

（山西医科大学公共卫生学院 营养与食品卫生学教研室，山西 太原 030001）

脂代谢紊乱和脂质合成分解障碍可致肥胖症的发生[1]。脂滴已被证实是一种在脂代谢中起重要作用的细胞器，主要成分是三酰甘油（triglyceride,TG）和胆固醇酯，脂滴表面有多种功能蛋白[2]。围脂滴蛋白（perilipin 1, PLIN1）作为PAT家族蛋白的一员，主要定位于脂滴表面，在脂肪分解代谢起屏障保护作用的一种可磷酸化蛋白[3-5]。短发卡RNA（small hairpin RNA, sh-RNA） 是 RNA干 扰（RNA interference, RNAi）技术的一种，可有效地降解同源序列的mRNA，进而抑制靶基因的表达[6]。本课题组前期已成功构建PLIN1基因的sh-RNA高效干扰载体，并已成功验证其可有效促进脂肪细胞的脂解作用[7]。

黄酮类化合物广泛存在于蔬菜水果中，具有强抗氧化性、抗肿瘤、调节血脂等生物学活性[8]。杨梅素（myricetin, Myric）作为黄酮类植物化学物中比较有代表性的的一种，可以通过降低PLIN1表达、磷酸化激素敏感性脂肪酶（hormone sensitive lipase, HSL），进而加速脂肪分解，降低TG和胆固醇[9-10]。

本研究拟通过Myric与PLIN1基因sh-RNA高效干扰载体联合干预，观察其对3T3-L1脂肪细胞脂解效率的影响，并探讨其可能机制，为今后肥胖症的防治提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料和试剂

3T3-L1前脂肪细胞系（小鼠胚胎成纤维细胞）由山西医科大学第一医院内分泌科惠赠，胎牛血清、DMEM/F12细胞培养基、胰蛋白酶溶液（100 ml）及青链霉素混合液（×100）购自武汉Boster生物工程有限公司，TG检测试剂盒（美国Amresco公司），甘油检测试剂盒（南京建成生物工程研究所），Myric（上海阿拉丁试剂有限公司），Lipofectamine ® LTX & Plus Reagent（美国Invitrogen公司），PLIN1A抗体、HSL抗体、ATGL抗体和β-Actin抗体购自英国Abcom公司。……