周世林 胡朝辉 丁宇星

缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)是发生率较高的新生儿疾病，对患儿脑神经功能发育可造成严重的影响，近半数患儿可出现神经系统后遗症，严重者甚至死亡[1]，故早期诊断和准确评估患儿病情严重程度对于有效防治HIE和选择恰当的治疗措施显得极为重要。相关研究证实[2]，血清S100B蛋白、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)水平检测可在一定程度上反映脑组织损伤的严重程度，而HIE也是导致新生儿脑组织损伤的重要因素，由此推测血清S100B蛋白、NSE可应用于HIE的早期诊断及病情严重程度评估方面，因此本研究拟予以探讨，从而有助于新生儿HIE的防治工作。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择大冶市人民医院新生儿科2015年2月—2017年12月期间住院治疗的85例HIE患儿作为研究对象，根据相关标准将65例HIE患儿分为轻度HIE组(27例)、中度HIE组(28例)及重度HIE组(30例)，同期选择30例正常新生儿作为对照组。本研究方案已通过医院伦理委员会审核和批准。

1.2 病例入选及排除标准

病例入选标准：患儿根据临床症状、实验室检查均符合HIE诊断标准[3]，所有患儿及正常新生儿家属均知情本项研究内容并签署同意书，胎龄>35周，新生儿出生体重≥2 000 g。病例排除标准：入院治疗未满6 h即死亡或要求自动出院放弃治疗，合并有宫内感染、脑发育严重异常、高胆红素血症、颅内出血和酸碱电解质平衡紊等情况的新生儿。

1.3 观察指标及检测方法

分别在正常新生儿出生后24 h时及HIE患儿出生后24 h、72 h及7 d时抽取外周静脉血液2 mL，3 000 r/min离心处理15 min，留取上层血清后采用酶联免疫吸附试验法检测血清S100B蛋白、NSE表达水平，采用相关标准在HIE患儿及正常新生儿出生后24 h时进行新生儿神经行为测定(neonatal behavioral neurological assessment, NBNA)评分[4]。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0统计软件予以分析，多组间计量资料比较采用方差分析，两两比较采用q检验，计数资料比较采用卡方检验，血清S100B蛋白、NSE水平与NBNA评分相关性分析采用Pearson法，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组临床资料比较

各组在性别、胎龄、出生体重及分娩方式等方面比较无显著性差异(P>0.05)，见表1。

表1 各组临床资料比较

注：各组临床资料比较，P>0.05

2.2 各组血清S100B蛋白、NSE表达水平及NBNA评分比较及相关性分析

各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平明显高于对照组(P<0.05)，而NBNA评分明显低于对照组(P<0.05)，且随着病情加重，HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平明显升高而NBNA评分明显降低(P<0.05)，血清S100B蛋白、NSE表达水平与NBNA评分呈负相关性关系(r=-0.625, -0.597,P<0.05)。

表2 各组血清S100B蛋白、NSE表达水平及NBNA评分比较及相关性分析

注：与对照组比较，1)P<0.05；重度、中度HIE组与轻度HIE组比较，2)P<0.05；重度HIE组与中度HIE组比较，3)P<0.05。

图1 各组血清S100B蛋白表达水平比较

图2 各组血清NSE表达水平及NBNA评分比较

2.3 不同时间点各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平变化比较

不同时间点各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平均存在明显差异性(P<0.05)，且随着病情加重，各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平明显升高(P<0.05)，随着时间延长，各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平明显降低(P<0.05)，见表3。

表3 不同时间点各组HIE患儿血清S100B蛋白、NSE表达水平变化比较

注：重度、中度HIE组与轻度HIE组比较，1)P<0.05；重度HIE组与中度HIE组比较，2)P<0.05；与前一时间点比较，3)P<0.05

图3 不同时间点各组HIE患儿血清S100B蛋白表达水平变化比较

图4 不同时间点各组HIE患儿血清NSE表达水平变化比较

3 讨论

HIE可导致新生儿智力发育迟缓、脑瘫、癫痫等较多神经系统后遗症，对患儿以后的生活质量造成严重影响。目前临床尚缺乏敏感的实验室诊断指标，仅依靠临床症状、体格检查难以作出早期诊断，从而丧失最佳的治疗时机[5]。通过脑电图及神经系统功能评定虽然可对HIE患儿病情严重程度作出评估，但易受到患儿精神状态及身体健康程度等因素的影响，缺乏必要的客观性[6]。

NSE是糖酵解生理途径中的关键酶，特异性存在于机体神经元和神经内分泌细胞内，可有效避免神经细胞受到缺氧、缺血等病理改变的损伤，当神经细胞出现严重损伤或死亡后，脑脊液和血液循环中的NSE表达水平明显升高，是临床判断脑神经细胞坏死的敏感实验室指标[7-8]。有研究证实[9]，NSE在诊断脑组织损伤和评估疾病预后方面具有重要的临床价值，且指标升高程度与脑组织损伤的严重程度之间存在正相关性关系。本研究显示，HIE患儿血清NSE表达水平明显高于对照组(P<0.05)，且随着病情加重明显升高而随着时间延长明显降低(P<0.05)，与NBNA评分呈负相关性关系(P<0.05)，此结果提示血清NSE可用于早期诊断新生儿HIE，且与HIE患儿病情严重程度有明显的相关性关系。分析原因在于HIE新生儿脑神经元受到缺血、缺氧等因素损伤，使得NSE大量释放和渗入至脑脊液中，血-脑脊液屏障保护系统破坏后，NSE随之进入血液循环系统中，最终导致血清NSE表达水平明显升高[10]。除了与脑神经细胞受到严重损伤因素以外，HIE患儿血清NSE水平升高还与NSE合成和分泌明显增加有关。但处于缺氧、缺血病理状态时，脑细胞能量代谢出现明显异常，使得调控NSE合成的基因表达水平显著性升高，进而导致NSE合成与分泌总量增加，以维持自身的正常功能。

S100B蛋白也是一种神经组织蛋白质分子，主要存在于中枢神经胶质细胞中，脑组织损伤早期阶段，由于脑神经元出现坏死导致S100B大量释放至脑脊液中，血-脑脊液屏障保护系统破坏后可进入血液循环系统中，故血清S100B可特异性和敏感反映患者中枢神经系统损伤的严重程度[11-13]。国外动物实验研究发现[14]，脑损伤大鼠血清S100B蛋白表达水平与脑组织损伤严重程度呈正相关性关系，采

取积极有效治疗后临床症状明显改善，且血清S100B蛋白表达水平明显降低。本研究显示，HIE患儿血清S100B蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)，且随着病情加重明显升高而随着时间延长明显降低(P<0.05)，与NBNA评分呈负相关性关系(P<0.05)，此结果提示血清S100B蛋白可用于早期诊断新生儿HIE，且与HIE患儿病情严重程度有明显的相关性关系，与上述研究相一致。

综上所述，血清S100B蛋白、NSE在新生儿HIE早期诊断及病情严重程度评估中具有重要的临床价值。