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基于CRISPR/Cas9技术的人胚胎干细胞多模态示踪系统构建

2018-11-14路兴爱赵振奥胡士军

复旦学报(自然科学版) 2018年5期
关键词:检测

路兴爱,吴 洁,赵振奥,胡士军

(1.苏州大学 心血管病研究所,江苏苏州 215000; 2.苏州大学 附属第一医院心脏大血管外科,江苏苏州 215006)

干细胞领域的飞速发展给再生医学带来了革命性的改变.特别是人胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cells, hESCs),其无限制的自我更新能力及可分化成任何一种细胞的特性[1-2],使其在干细胞研究、人类疾病模型建立、药物筛选中发挥着巨大的作用,更是细胞治疗的重要供体来源.然而进一步的研究发现hESCs的移植面临着细胞存活率低、畸胎瘤形成、以及免疫排斥等一系列问题[3],构建稳定表达报告基因的细胞株可对移植干细胞的命运进行实时监控,有助于移植策略的优化.

多模态成像是指将光学成像与其他成像模式相结合,同时获得多种参数的成像方式,最新的进展是三融合报告基因技术,由生物发光,荧光和PET(Positron Emision Tomograph)报告基因组成[4].生物发光是生物利用体内的酶将化学能转化为光能而发光的一种现象,常见的酶包括萤火虫荧光素酶(Fluc)和海肾荧光素酶(Renilla Luciferease, Rluc)等,可以通过与底物反应产生光,从而被电荷耦合器(CCD)捕获,这种影像模式目前可用于小动物成像,具有灵敏度高、特异性强等优点,但是其固有的劣势局限了在人类疾病临床中的应用.荧光显像,在生物学领域应用十分广泛,常见的报告基因有copGFP、eGFP和RFP等,但是这种成像方式信噪比和灵敏度较低.PET是核医学领域比较先进的临床检查影像技术,其分子探针为正电子核素(如放射性核素F18等)标记分子(HSV-ttk),具有……

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