抵当汤调控深静脉血栓形成大鼠Th1/Th2信号漂移的实验研究
2018-11-14张玉冬侯光敏
安 震 张 玥 张玉冬 侯光敏
(1.山东中医药大学,山东济南250014; 2.山东中医药大学附属医院周围血管病科,山东济南250014)
近年来,深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)的发病率逐年上升,随着对本病发病机制研究的不断深入,炎症在DVT中的作用越来越受到重视[1]。有学者提出DVT形成的关键事件最有可能是静脉壁的炎症[2]。炎症细胞因子作为炎症反应的关键物质,能够通过诱导组织因子的表达促进血液的高凝状态,在DVT中起着重要的作用。辅助性T细胞(Th)的两种亚型Th1和Th2细胞分别分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)等促炎因子和白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)等抗炎因子,这些因子的失衡导致Th1/Th2的漂移,从而导致疾病进展。本研究以动物实验为基础,从分子生物学的角度探讨Th1/Th2在DVT中的变化规律以及中药抵当汤的干预作用。
1 实验材料
1.1 实验动物 雄性Wistar大鼠120只,12周龄,体重200~250g,清洁级,购自山东大学动物实验中心(许可证号:SCXK鲁20130009)。1.2 实验药物 抵当汤的四味药物均购于山东中医药大学附属医院,依据《伤寒论》记载的剂量,折算后大黄45g、炒水蛭40g、炒虻虫10g、桃仁6g。汤液浓缩后折算药物浓度为2g/mL,4℃冰箱储存备用。
1.3 实 验 试 剂 TNF-α、IL-4和IL-10的 大 鼠 放免试剂盒,北京普尔伟业生物科技有限公司;大鼠IFN-γ ELISA试剂盒,R&D进口分装,上海门碟塔生物有限公司;水合氯醛,上海化学试剂采购供应站分装厂。
1.4 实验仪器 DDL-5冷冻离心机,上海安亭科学仪器厂;SN-695型智能放射免疫γ测量仪,上海核所日环光电仪器有限公司;WT11001R型电子天平,江苏省常州市万得天平仪器厂。
2 实验方法
2.1 模型制备 采用Rryers法[3]。……
