聂明，金培印

心肌缺血、高血压等心血管系统疾病的发生与心肌肥厚有关，是心脏受到多种刺激以后产生的一种代偿性的反应，是猝死、心力衰竭等发生的危险因素，肾素-血管紧张素系统是心室肥厚发生的重要原因，而血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是肾素-血管紧张素系统中重要的促心肌细胞肥大因子[1,2]。转化生长因子β1（TGF-β1）具有广泛的生物学作用，其是生长因子超家族中的一员，在胚胎发育、免疫反应、肿瘤发生等过程中具有重要作用[3,4]。近年来的研究显示，TGF-β1参与心力衰竭发生，在心力衰竭大鼠模型中表达升高，并且可以调控细胞的生长、凋亡等过程，在心肌纤维化和细胞外基质的异常增多等过程中发挥关键作用[5,6]。本实验拟通过体外分离培养乳鼠心肌细胞，探讨TGF-β1在AngⅡ诱导的心肌肥大中的作用，并对其作用机制进行初步探讨。

1 资料与方法

1.1 研究对象和分组出生72 h的SD乳鼠由华中科技大学同济医学院动物实验室提供；参照文献[7]，取出生72 h的SD乳鼠，用乙醚麻醉以后，取出心脏，用眼科剪把心肌组织剪碎（＜1 mm3），添加5倍体积的消化酶（0.125%胰蛋白酶+0.04%的EDTA），混合后，在提前预热的37℃的水浴中消化5 min。静置3 min，把上清吸除。在沉淀中加入5倍体积的0.1%的Ⅰ型胶原酶，继续在37 ℃的水浴中消化5 min。吸取上清，加入到15%胎牛血清的DMEM中，重复用Ⅰ型胶原酶消化直至组织消化完全。将消化后的所有上清以1200 g离心10 min，在细胞沉淀中加入PBS洗涤2次。用15%胎牛血清的DMEM悬浮细胞，按照约106个细胞/ml种植到细胞瓶中，贴壁差1 h分离心肌细胞。……