姚炯涛

[摘要]目的 研究可溶性B7-H4在类风湿性关节炎诊断中的意义。方法 选取2013年1月～2014年12月我院收治的类风湿性关节炎（RA）患者65例为RA组，骨性关节炎（OA）66例为OA组，并选取同时期来我院行健康体检对象70例为健康组。利用酶联免疫吸附法（ELISA）对三组患者可溶性B7同源体4（sB7-H4）、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、葡萄糖6-磷酸异构酶（GPI）水平，免疫比浊法测定患者的类风湿因子（RF）。比较分析sB7-H4在RA诊断中的意义。结果 RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI水平显著高于OA组及健康组，差异均有统计学意义（P<0.05）。sB7-H4与RF、抗CCP抗体成正相关关系，而与GPI水平无相关性。另外，RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI阳性率显著高于OA组与健康组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 sB7-H4在诊断RA中有着很高价值，临床应用前景较好。

[关键词]可溶性B7-H4；类风湿性关节炎；诊断意义；抗CCP抗体水平

[中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2018）6（c）-0112-03

[Abstract]Objective To study the significance of soluble B7-H4 in the diagnosis of rheumatoid arthritis.Methods A total of 65 rheumatoid arthritis （RA） patients and 66 osteoarthritis （OA） patients admitted to our hospital from January 2013 to December 2014 were selected.At the same time，70 patients were selected for physical examination in our hospital.The serum levels of sB7-H4，anti-cyclic citrullinated peptide （CCP） antibodies，and glucose 6-phosphate isomerase （GPI） levels were measured in three groups by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.The patient′s rheumatoid factor（RF） was measured by immunoturbidimetry.The significance of sB7-H4 in the diagnosis of RA was compared and analyzed.Results The levels of sB7-H4，RF，anti-CCP antibody and GPI in RA group were significantly higher than those in OA group and healthy group，the differences were statistically significant（P<0.05）.sB7-H4 was positively correlated with RF and anti-CCP antibodies but not with GPI levels.In addition，the positive rates of sB7-H4，RF，anti-CCP antibodies，and GPI in the RA group were significantly higher than those in the OA group and the healthy group，the differences were statistically significant （P<0.05）.Conclusion sB7-H4 has high value in diagnosing RA and has good clinical application prospects.

[Key words]Soluble B7-H4；Rheumatoid arthritis；Diagnostic significance；Anti CCP antibody level

類风湿性关节炎（RA）是一个累及周围关节为主的多系统炎症性的自身免疫病，我国发生RA的概率为0.35%左右，是导致人们丧失较强劳动力及致残的重要病因[1]。尽管近年来发现的一些诊断指标如类风湿因子、抗核周因子、抗瓜氨酸环肽抗体等对RA的诊断有一定的价值，但这些指标阳性或升高亦可见于系统性红斑狼疮、干燥综合症等其他免疫性疾病，因而RA临床诊断存在着特异性不明显、灵敏度较低等问题[2-3]。因此，在进行RA早期诊断时，筛选新型的检测物对这项工作有着重要影响。本研究选取我院收治的RA患者、骨性关节炎（OA），并选取同时期来我院行健康体检对象70例，探讨sB7-H4在诊断RA中的价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2013年1月～2014年12月我院收治的RA患者65例为RA组，男女性别比为32∶33，年龄28～69岁，平均（43.98±4.98）岁。OA患者66例为OA组，男女性别比为33∶33，年龄29～72岁，平均（43.43±4.25）岁。并选取同期来我院行健康体检对象70例为健康组，男女性别比为36∶34，年龄31～71岁，平均（43.06±4.66）岁。三组研究对象的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。所有研究对象均知情同意，本研究经医院医学伦理委员会的审核。

1.2仪器与试剂

酶联微量反应板、抗小鼠可溶性B7同源体4（B7-H4）多克隆抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG（免疫球蛋白G），TMB底物（3，3，5，5-四甲基聯苯胺底物溶液）、抗人B7-H4单克隆抗体及显色剂。抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、葡萄糖6-磷酸异构酶（GPI）试剂，类风湿因子（RF）试剂。全自动生化分析仪（贝克曼公司，型号au480）、全自动酶联免疫分析仪（美国贝克曼库尔特公司，型号DxI800）。

1.3采集标本

清晨空腹取静脉血3 ml离心留血清备用，采取酶联免疫吸附试验法对B7-H4含量、CCP含量进行测定，采取乳胶凝集法对RF予以检验，采取抗核抗体制ANA（IIF）法对抗核周因子进行检测。

1.4判断标准

RF>20 U/ml为阳性；抗CCP抗体>5 U/ml为阳性；GPI抗原>0.2 mg/L[4]为阳性；sB7-H4>36.5 μg/L为阳性。

1.5统计学方法

采用SPPSS 20.0统计学软件进行统计学处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验；多组计量资料比较采用F检验，计数资料以率表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1三组sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI水平的比较

RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI水平显著高于OA组及健康组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

2.2三组sB7-H4与RF、抗CCP抗体、GPI水平的相关性分析

将RA组的sB7-H4水平与RF、抗CCP抗体、等进行单因素分析，结果显示，sB7-H4与这些指标间成正相关关系，而与GPI水平无相关性，sB7-H4与RF的相关性（r=0.612，P<0.05）；sB7-H4与抗CCP抗体的相关性（r=0.536，P<0.05）；sB7-H4与GPI的相关性（r=0.209，P>0.05）。

2.3三组sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI诊断阳性率的比较

RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI诊断阳性率显著高于OA与健康组，差异均有统计学意义（P<0.05）（表2）。

3讨论新成员，有抑制细胞增殖，抑制细胞因子生长及阻碍细胞周期进程的作用，可以对细胞的免疫应答进行负相调控[5]。B7-H4的mRNA在淋巴样及非淋巴样组织中得到广泛表达，但实际上它的蛋白质在各种组织中的表达性较低，而在树突状细胞及单核细胞、T细胞、B细胞表面有着较高的诱导性表达[6]。B7-H4可对肿瘤细胞的胞浆及胞膜进行表达，另外还会发现其在血清中的存在形式为可溶性形式[7]。B7-H4可有效地对T细胞增殖产生抑制，并抑制细胞因子，抑制细胞周期进程，进而负性调控T细胞免疫应答；其能促进上皮细胞向恶性转化，并有效的保护肿瘤细胞，调控肿瘤细胞的发生发展及转归。B7-H4中可能存在缺失跨膜区剪切体并在血清中表达，且能通过基质金属蛋白酶作用而从膜蛋白脱落到血清。

实验表明，乳腺癌及肺癌等癌症类型的患者，其血清B7-H4水平出现显著增高[8-9]。通过对RA患者发病机制进行研究，发现在其中起主导作用的为T细胞[10-11]。这种细胞群会转移到患者的病变关节，在对其中特定的抗原肽进行识别后，释放了多种炎症因子，如白介素-17（IL-17）、干扰素-γ（INF-Y）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）[12-13]。通过这样的作用，实现滑膜细胞增值，使其形成血管翳，最终破坏患者。通过研究T细胞活化机制得出，T细胞活化及效应发挥需要有共刺激信号的作用。若是在其活化过程中，没有共刺激信号，抗原刺激就容易出现免疫耐受的情况。已知的几种共刺激分子在RA中占据主导作用[14]。如在对RA患者进行治疗时连续6个月使用细胞毒T细胞抗原4（CTLA-4-Ig）融合蛋白，会发现患者本身含有的关节炎症出现减轻，生活情况也因关节炎症的减轻而得到好转。国内外有关B7-H4与RA的关系报道甚少[15-16]。

本研究结果显示，RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI水平显著高于OA组及健康组（P<0.05）。sB7-H4与RF、抗CCP抗体成正相关关系，而与GPI水平无相关性。另外，RA组的sB7-H4、RF、抗CCP抗体、GPI阳性率显著高于OA组与健康组（P<0.05），提示可溶性B7-H4在RA诊断、判断预后和转归及评价治疗疗效等方面，都具有较高的实用价值。如可溶性B7-H4可作为新的RA标志物，且在发病早期就能检测，那么采取有针对性的治疗措施能降低病患的致残率，有良好的经济效益及社会效益，此外还可将sB7-H4作为一种潜在的分子靶点，以提供新的肿瘤治疗策略。

综上所述，sB7-H4在诊断RA中有着很高价值，临床应用前景较好。

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（收稿日期：2018-03-15 本文编辑：崔建中）