徐 润，孙燕泥，杨 冉，唐 恬，陈春月，阳明芳，付贤宁，宁 竣，陈灵燕，唐 瑜

(成都医学院 1.检验医学院；2.基础医学院；3.体温与炎症四川省高校重点实验室，四川 成都 610500)

精氨酸加压素(arginine vasopressin，AVP)是由下丘脑视上核和室旁核神经元合成的九肽激素，在体温调节中发挥重要的负调节作用[1]。中枢或外周给予AVP引起大鼠低温反应，而AVP V1a受体抑制剂使大鼠体温和棕色脂肪组织温度升高[1- 4]。下丘脑视前区(preoptic area，POA)分布的温度敏感神经元参与体温调节[5]。AVP通过激活V1a受体兴奋视前区热敏神经元，抑制冷敏神经元[6]。谷氨酸激活视前区α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid, AMPA)受体可以升高大鼠体温[7]，而阻断中枢谷氨酸促离子型受体，可以抑制外周注射AVP引起的低温反应[8]。在海马、外侧隔区、下丘脑室旁核和脑干等部位，AVP通过激活V1a受体抑制谷氨酸能突触传递[9]，但AVP是否影响视前区AMPA受体表达尚不清楚。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物：SPF级雄性SD大鼠，体质量200～250 g[成都达硕实验动物有限公司，合格证号SCXK(川)2015- 030]。

1.1.2 试剂：RNAlater和Trizol(Invitrogen公司)；DEPC(Sigma公司)。PrimeScript RT reagent Kit、FastStart Essential Probes Master(大连宝生物工程有限公司和Roche公司)；核酸染料4s red(生工生物工程股份有限公司)；TEMED、RIPA裂解液和PMSF(上海碧云天生物技术有限公司)；BCA蛋白含量检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司)；4×上样缓冲液(Bio-Rad公司)；蛋白Marker(Thermo Fisher公司)；ECL化学发光试剂盒(Millipore公司)；一抗GluR1、GluR2和GluR3(CST公司)；β-actin抗体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(H+L)(Abcam公司)。

1.1.3 探针与引物：荧光定量PCR检测目的基因所使用探针(Roche公司)，所需引物为该探针库所匹配的特异引物(表1)。引物由成都梓熙擎科生物技术公司合成。……