彭伟如　冯奕习　梁晶晶

【摘要】 目的：探讨脂联素（Adiponectin，ADPN）联合瘦素（Leptin，LP）在结直肠癌高危人群中的诊断价值。方法：选取2016年6月-2017年4月本院收治的结直肠癌患者50例作为A组，于同期另选取50例健康体检者作为B组，测定两组血清ADPN和LP水平，应用受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic curve，ROC）曲线分析血清ADPN和LP对结直肠癌的诊断效能。结果：A组血清ADPN水平明显低于B组，差异有统计学意义（P<0.05）；A组血清LP水平明显高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）；ROC曲线显示，两项联合对结直肠癌的敏感度和特异度最高，约登指数和曲线下面积最大。结论：联合检测脂联素联合瘦素有助于提高结直肠癌的检出率。

【关键词】 脂联素； 瘦素； 结直肠癌； 肿瘤标志物

【Abstract】 Objective：To discuss the diagnosis value of combining Adiponectin（ADPN） and Leptin（LP） in high risk population with colorectal cancer.Method：A total of 50 patients with colorectal cancer from June 2016 to April 2017 were selected as A group，and 50 cases of health examiner were selected as B group.The serum levels of ADPN and LP were detected.ROC curve was used to analyze the evaluate the diagnostic efficiency of ADPN combined with LP measured in the study subjects.Result：Serum levels of ADPN in A group was lower than that of B group（P<0.05）.Serum levels of LP in A group was higher than that of B group（P<0.05）.ROC curve showed：the sensitivity，specificity，Youden index and AUC of ADPN+LP was the highest.Conclusion：The combined screening of ADPN and LP can significantly improve the detection rate of colorectal cancer.

【Key words】 Adiponectin； Leptin； Colorectal cancer； Tumor marker

First-authors address：The Hospital of Traditional Chinese Medicine in Dongguan City，Dongguan 523000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.21.033

一项关于结直肠癌TNM分期的临床研究显示，结直肠癌是高度异质性的肿瘤，患者生存及预后与分期与所在临床分期或病理分期密切相关[1]。早期结直肠癌往往能够通过外科手术根治，而进展期或远处转移的结直肠癌一般预后较差[2-4]。由于结直肠癌起病隐匿、高危人群疾病预防知识不足等原因，有50%～70%的结直肠癌患者新诊断时已是进展期甚至晚期，错过了最佳治疗时间[5-7]。因此，一种适合用于结直肠癌早期筛查的诊断试验或能降低结直肠癌的进展风险和减轻公共卫生负担。现阶段，内窥镜检查、影像学检查、脱落细胞学检查及CA199等血清肿瘤标志物检查均不符合简便、经济、灵敏度高及早期诊断等要求[8-9]。为此，本院开展此项研究，旨在探讨脂联素（Adiponectin，ADPN）联合瘦素（Leptin，LP）在结直肠癌高危人群中的诊断价值，为结直肠癌诊断提供科学依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年6月-2017年4月本院收治的结直肠癌患者50例作为A组，年龄37～75岁，平均（61.42±9.40）岁；体质指数（BMI）19～29 kg/m2，

平均（25.31±2.49）kg/m2；男27例，女23例。于同期另选取50例健康体检者作为B组，其中年龄35～73岁，平均（57.28±9.76）岁；BMI 20～28 kg/m2，平均（24.50±1.92）kg/m2；男27例，女23例。

1.2 方法 采用真空釆血管抽取受试者早晨空腹肘静脉血5 mL，全血静置120 min后，真空离心浓缩仪（德国sigma公司）分离上清液，血清移至试管中，放置于-80 ℃冰箱冷冻保存。采用固相夹心ELISA法测定受试者血清中脂联素和瘦素水平，脂联素和瘦素的试剂盒均购自广州边金生物科技有限公司，操作方法严格按照试剂盒说明进行，并有相应的质量控制措施，具体如下：（1）试剂盒准备：试剂盒使用前30 min室温下冻融；浓缩洗涤液用水浴加热以溶解结晶；浓缩洗涤液冲兑蒸馏水（体积分数1︰1），调配成洗涤缓冲液备用；显色液A冲兑显色液B（体积分数1︰1），调配成显色剂A、B备用。（2）操作程序：在酶标包被板的第1、2号孔中添加100 μL标准品，继续添加50 μL稀释液，混匀；在第1、2号孔中各取100 μL样品稀释液，添加到第3、4号孔中，继续添加50 μL稀释液，混匀；在第3、4号孔中各取100 μL样品稀释液，弃掉50 μL后，再添加到第5、6号孔中，继续往第5、6号孔中添加50 μL稀释液，混匀；在第5、6号孔中各取50 μL样品稀释液，添加到第7、8号孔中，继续往第7、8号孔中添加50 μL稀释液，混匀；在第7、8号孔中各取50 μL样品稀释液，添加到第9、10号孔中，继续往第9、10号孔中添加50 μL稀释液，混匀，之后弃掉50 μL样品稀释液；第11、12号孔分别设空白对照孔（不添加样品和酶标试剂）；第13、14号孔分别待测样品孔（添加50 μL樣品稀释液）。封板后置温育

30 min（37 ℃）。温育后解除封板，每孔添加满洗涤缓冲液，在静置30 s 后弃掉，如此反复5次，拍干。标准孔中添加50 μL酶标试剂。再次温育、洗涤，步骤同上。在37 ℃、避光环境下，每孔各添加50 μL显色剂A、B，混匀，静置15 min。每孔各添加50 μL终止液，混匀，静置15 min。空白对照孔调零，450 mm波长读板（OD值）。以标准物的质量浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在笛卡尔坐标系上绘出标准曲线，通过标准曲线计算样品中脂联素和瘦素质量浓度，乘以稀释倍数，即为样品的实际质量浓度。

1.3 统计学处理 采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料若呈正态分布组间用（x±s）表示，比较采用配对资料t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以活体组织检查结果为“金标准”，应用ROC曲线分析血清ADPN和LP对结直肠癌的诊断效能。检验水准α=0.05，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清ADPN和LP水平比较 A组血清ADPN水平明显低于B组，差异有统计学意义（P<0.05）；A组血清LP水平明显高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 血清ADPN和LP对结直肠癌的诊断效能 以

7.6 mg/L为截点值，ADPN对结直肠癌的敏感度为82.0%、特异度为72.0%、AUC为76.61%、约登指数为0.54；以3.1 ng/mL为截点值，LP对结直肠癌的敏感度为68.0%、特异度为64.0%、AUC为65.84%、约登指数为0.32；ADPN联合LP对结直肠癌的敏感度为88.0%、特异度为76.0%、AUC为81.28%、约登指数为0.64。见表2。

3 讨论

ADPN是脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽或蛋白质，其通过多条路径抑制结直肠癌细胞生长和增殖、诱导内皮细胞凋亡[10-11]。已有循证医学证据表明，ADPN是结直肠癌的独立保护因素[12]。LP是一種由脂肪组织分泌的蛋白质类激素，其通过多条信号通路参与细胞及细胞因子的调节，促进肿瘤细胞增殖、黏着、侵袭及癌组织新生血管形成[13-16]。已有基因组学证据表明，LP的基因多态性显著影响结直肠癌发病风险[17]。本研究结果显示，A组血清ADPN水平比B组低，A组血清LP水平比B组高，差异均有统计学意义（P<0.05）。提示，结直肠癌患者血清ADPN低表达，结直肠癌患者血清LP高表达。应用ROC曲线和整合区分指数评价血清标志物对疾病的诊断价值的研究先前已有报道。因此，血清ADPN和LP或可用于结直肠癌的鉴别诊断、早期诊断及预后判断等方面。文献[18-19]也得出过类似结果，不过受制于研究方法较为单一，故未能揭示血清ADPN和LP对结直肠癌的诊断价值。基于这一现况，本研究进一步应用ROC曲线分析血清ADPN和LP对结直肠癌的诊断效能。

以病理检查结果为“金标准”，应用sigmaplot科学绘图软件绘制ROC曲线，求得ADPN对结直肠癌的最大约登指数（特异度+敏感度-1）为0.54，以最大约登指数为截点值，求得ADPN对结直肠癌的最佳截点值为7.6 mg/L，在上述截点值下，ADPN对结直肠癌的敏感度为82.0%、特异度为72.0%、AUC为76.61%。依照上述方法，求得LP对结直肠癌的最佳截点值为3.1 ng/mL，在上述截点值下，LP对结直肠癌的敏感度为68.0%、特异度为64.0%、AUC为65.84%、约登指数为0.32。灵敏度越高，代表该诊断试验漏诊概率越小；特异度越高，代表该诊断试验误诊概率越小；AUC是一项能够反映诊断试验总体诊断效能的指标，不像敏感度、特异度有对应的临床解释，一般认为AUC越大表示诊断试验的诊断效能约高；约登指数用于评价诊断试验的真实性，理想的诊断试验约登指数应为1[20]。由此可见，血清ADPN和LP均能够用于诊断结直肠癌，可是特异度、敏感度、真实性、诊断效能均不甚理想。联合试验往往能够提高诊断试验的诊断效能，为此，笔者使用整合区分指数串联血清ADPN和LP诊断结直肠癌。本研究结果显示，两项联合对结直肠癌的敏感度为88.0%、特异度为76.0%、AUC为81.28%、约登指数为0.64。由此可见，两项联合诊断结直肠癌能够提高特异度、敏感度、真实性、诊断效能。

综上所述，联合检测脂联素联合瘦素有助于提高结直肠癌的检出率。

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（收稿日期：2018-04-24） （本文编辑：程旭然）