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新疆库尔勒香梨果皮中多糖含量的测定

2018-09-28海仁古丽麦麦提王安平阿依夏古丽巴卡斯海力茜陶尔大洪

新疆医科大学学报 2018年9期
关键词:库尔勒香梨定容

海仁古丽·麦麦提, 王安平, 阿依夏古丽·巴卡斯, 海力茜·陶尔大洪

(新疆医科大学1药学院, 乌鲁木齐 830011; 2第二附属医院麻醉科, 830063)

库尔勒香梨(PyruscommunisL.)为蔷薇科梨属植物白梨的果实,原产于新疆库尔勒地区,距今已有1 400多年的历史[1]。库尔勒香梨中主要含有多糖、挥发油、甾体类、黄酮类等化学成分,多糖是香梨中的主要成分,具有增强人体免疫力、促进淋巴细胞产生等作用,已成为日常生活中常见的水果[2-4]。本课题组前期已对库尔勒香梨的化学成分、微量元素进行了测定和研究[5-6]。本研究采用苯酚硫酸法测定库尔勒香梨果皮中的多糖含量,现报道如下。

1 仪器与试药

1.1仪器UV-2550型紫外分光光度计(日本岛津),AB135-5型分析天平(Mettler-Teledo),SK5200HP型超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司),RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器有限公司),HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)

1.2试剂苯酚(天津市北联精细化学品开发有限公司,批号20160711),5%葡萄糖(成都维克奇生物科技有限公司,批号H5102634),苯(四川科伦药业股份有限公司,批号2015312),98%浓硫酸(河南升宏化工产品有限公司,批号20161212)。

1.3药材库尔勒香梨2016年9月购于新疆库尔勒市,经新疆医科大学药学院帕丽达·阿不力孜教授鉴定为蔷薇科梨属植物白梨(PyruscommunisL.)的果实。收集库尔勒香梨的果皮,自然风干,用研钵研成粗粉,置于干燥处储存备用。

2 方法与结果

2.1对照品溶液的制备称取葡萄糖对照品10.00 mg,并将它放入100 mL容量瓶中,用蒸馏水定容,配置成浓度为0.1 mg/mL的对照品,备用。

2.2样品溶液的制备取库尔勒香梨果皮,自然风干,用研钵研成粗粉,称取样品1.00 g置于250 mL圆底烧瓶中,加入蒸馏水60 mL,回流提取2次,每次180 min,将2次的提取液合并后倒入100 mL容量瓶,用蒸馏水定容至刻度,吸取1.5 mL于10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,备用。

2.3标准曲线的制备分别吸取“2.1”项下对照品溶液0.20、0.30、0.40、0.50、0.60 mL置于10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度配制成浓度分别为0.002、0.003、0.004、0.005、0.006 mg/mL 的溶液,各吸取2.00 mL置于试管中,加入5%苯酚溶液1.00 mL,浓硫酸5.00 mL,放置30 min,测定490 nm处吸光度,以浓度为横坐标(X),吸光度值为纵坐标(Y),绘制标准曲线,得回归方程:Y=15.45X-0.057 8(R=0.996 7),在0.018 5~0.058 9 mg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.4加样回收率试验吸取“2.2”项下样品溶液9份,每份3.86 mL,置于10 mL容量瓶中,分别加入“2.1”项下照品溶液50、150、350 μL各3份,置于容量瓶中,按“2.3”项下方法测定,按公式:加样回收率/%=测定值-本底值/加入值×100%计算,库尔勒香梨果皮中多糖的加样回收率为100.2%,RSD为6.2%,见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=3)

2.5稳定性试验吸取150 μL样品溶液,置于10 mL容量瓶,按“2.3”项下方法分别在1、2、3、4、5、6 h测定490 nm处吸光度,经计算RSD为5.8%,表明试验在6 h内稳定性良好,见表2。

表2 稳定性试验结果(n=3)

2.6精密度试验吸取“2.1”项下对照品溶液2.00 mL,共6份,按“2.3”项下方法测定,对照品的RSD为1.2%,表明方法精密度良好,见表3。

表3 精密度试验结果(n=6)

2.7样品含量的测定取“2.2”项下样品溶液2.0 mL,按“2.3” 项下方法测定,以2.0 mL蒸馏水按同样方法测定为空白,经计算库尔勒香梨果皮中多糖的含量为3.45 mg/g,见表4。

表4 库尔勒香梨果皮中多糖含量(n=3)

3 讨论

本研究采用苯酚-浓硫酸为显色剂,可见分光光度法[7-12]测定库尔勒香梨果皮中多糖含量,测定前苯酚-浓硫酸溶液需要现配现用,冰箱中避光储存,对照品和样品显色时间要保持一致,减少测定误差。本实验方法操作简便,测定结果准确,适用于库尔勒香梨果皮中多糖的含量测定,为库尔勒香梨的质量控制和副产品研发提供了理论依据。

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