金蛭方对缺血性中风大鼠caspase—3、Bax、Bcl—2蛋白表达的影响
2018-09-18吴翟王彩荣张灵敏杨建新周恒王丽
吴翟 王彩荣 张灵敏 杨建新 周恒 王丽
【摘 要】 目的:通过观察金蛭方对缺血性中风大鼠缺血侧大脑皮质区细胞调亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量的影响,探讨金蛭方治疗缺血性中风的作用机制。方法:采用线栓法复制缺血性中风大鼠模型,随机分为假手术组、模型对照组、金蛭方高剂量组、金蛭方低剂量组、阳性药尼莫地平片对照组。应用western-blot技术检测caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白含量变化。结果:模型组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达较假手术组明显降低(P<0.01);caspase-3、Bax蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01)。用药后各治疗组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);caspase-3、Bax蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。高、低剂量组在增强Bcl-2蛋白表达和降低caspase-3、Bax蛋白表达方面的作用优于对照组。结论:金蛭方通过调节缺血性中风大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达达到拮抗缺血性中风作用。
【关键词】 金蛭方;缺血性中风;caspase-3、Bax、Bcl-2
【中图分类号】R965 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2018)11-0006-04
Abstract:Objective To observe the effect of Jinzhifang on the content of Bax, bcl-2, caspase-3 protein in cerebral cortex region of ischemic stroke rats, and to investigate the mechanism of the treatment of ischemic stroke with Jinzhifang. Methods Using the suture method to copy the rat model of ischemic stroke were randomly divided into sham operation group, model control group, the Jinzhi fang decoction high dose group, the Jinzhi fang low dose group, positive drug nimodipine tablets in the Jinzhi fang. The content changes of caspase-3, Bax and bcl-2 were detected by using western-blot technique. Results The expression of Bcl-2 protein in ischemic cortex in model group was significantly lower than that in sham group(P<0.01). The expression of caspase-3 and Bax protein was significantly higher than that of sham operation group (P<0.01). The expression of Bcl-2 protein in the ischemic cortex of rats increased obviously after the treatment(P<0.05,P<0.01).The expression of caspase-3 and Bax protein decreased obviously(P<0.05,P<0.01).The effect of Bcl-2 protein expression and decrease of caspase-3 and Bax protein in high and low dose group was better than that in control group。Conclusion The Jinzhi fang through regulation of ischemic stroke rat Expression of casase-3, Bax, Bcl-2 proteins and release in order to achieve the antagonistic effect of ischemic apoplexy.
Keywords:Jinzhifang; Ischemic Stroke; Caspase-3、Bax、Bcl-2
缺血性中風所致脑损伤的病理机制尚不完全清楚,目前有多种研究,其中细胞调亡在缺血半暗带损伤级联反应过程中起着十分重要的作用[1],因此关于神经细胞调亡机制的探索及基于抗调亡为靶点的治疗药物探究是缺血性中风的研究热点。金蛭方系课题组经过多年筛选出的治疗缺血性中风的效方,临床应用10余年,疗效明显,但其作用机制不十分明确,本研究以期从细胞凋亡角度探讨金蛭方对缺血性中风的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 健康雄性SD大鼠60只,清洁级,体重250~300 g,由河北省实验动物中心提供,合格证号:1119069。
1.2 药物与试剂 金蛭方组成:水蛭、郁金、川芎、冰片(由迁安市中医医院制剂室制备),上4味除冰片外水提浓缩成高、低剂量后加入相应研磨冰片,所含生药分别为:0.30 g/mL(高剂量)、0.15 g/mL(低剂量)。尼莫地平片(郑州瑞康制药有限公司提供,国药准字:H41022175,规格:20 mg/片)。按体重0.00 1g/mL配制成水溶液。……
