河南省信阳市中心医院病理科(河南 信阳 464000)

杨长俊

肺癌是临床最常见恶性肿瘤之一，发病率及死亡率均居于所有恶性肿瘤之首，且呈逐年增高趋势[1]。研究显示，I期肺癌术后10年生存率超过90%，因此，早期诊断及治疗是提高患者生存率之关键[2]。小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)虽仅占肺癌的15%～20%，但其细胞分化差、转移早、恶性程度高，较之非小细胞肺癌(no-small cell lung cancer,NSCLC)，病情进展更为迅速，预后更差，受到越来越多关注[3]。目前，CT是肺癌诊断的常用影像学检查方法，但其易受检查者主观因素影响，存在较高假阳性率、假阴性率。近年来，神经内分泌标志物对临床诊断的价值引起临床广泛重视。研究显示，突触素(synaptophysin,Syn)、嗜铬蛋白(chromogranin A,CgA)在SCLC中有着较高表达[4]。本研究采用免疫组化法检测检测Syn、CgA在SCLC、NSCLC中的表达，探讨其联合CT诊断SCLC的临床价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2015年3月～2017年3月在我院接受手术切除治疗并经术后病理证实的95例肺癌患者临床资料，其中SCLC45例，男31例，女14例；年龄31～82岁，平均(61.25±17.62)；临床分期：I～II期16例，III～IV期29例；有吸烟史35例；有淋巴结转移27例；NSCLC50例，男36例，女14例；年龄30～80岁，平均(60.87±15.28)岁；临床分期：I～II期18例，III～IV期32例，有淋巴结转移26例。两组性别比例、年龄、临床分期、淋巴结转移情况等资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)。所有患者术前均未行任何抗肿瘤治疗，均完成CT检查，术后均采集癌组织。本研究取得医院医学伦理委员会批准，所有患者对研究知情同意。

1.2 方法

1.2.1 CT检查

1.2.1.1 检查方法：采用德国西门子公司SOMATOM Definition 128层多排螺旋CT机及MEDRAD VISRON CT高压注射器，行胸腹部联合扫描。检查时，患者取仰卧位，双手抱头，深吸气后屏气，扫描参数：管电压120kV，管电流自动匹配，层厚为5mm，层距为5mm，螺距为5mm，扫描范围由肺尖部至耻骨联合水平。增强扫描：经肘静脉注入80～100ml非离子造影剂(300mg I/ml)，注射速率为2.5～3.0ms/s，动脉期、静脉期于一次性屏气后完成，必要时延迟2～3s行肝脏、腹腔扫描。

1.2.1.2 图像处理：将扫描图像上传至ADW4.4工作站，由2名副主任以上影像医师采用盲法进行独立分析，观察图像，记录病灶部位、大小、形态、密度、边缘、胸腔积液、胸膜转移、纵膈大血管受侵及淋巴结、远处转移等情况，诊断意见出现分歧时，经讨论取得一致。

1.2.2 癌组织及癌旁组织Syn、CgA检测

1.2.2.1 试剂与仪器EscelsiorTMES组织脱水机(赛默飞世尔科技有限公司)，ESHistostar组织包埋机(赛默飞世尔科技有限公司)，Finesse ME全自动石蜡切片机(赛默飞世尔科技有限公司)，Qp.B型切片漂烘仪(安徽电子研究所)，S-P超敏免疫组织化学试剂盒(福州迈新生物技术有限公司)，3,3二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(合肥康源生物科技研究所)，Leica光学显微镜(德国Leica公司)；兔抗人Syn单克隆抗体(福建迈新生物技术有限公司)，鼠抗人CgA单克隆抗体(福建迈新生物技术有限公司)。

1.2.2.2 标本采集：取所有患者肺癌组织标本，均以10%福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋，4μm厚切片，连续切5张，切片后采用免疫组化SP法检测Syn、CgA表达。免疫组化结果由2名经验丰富的病理医师独立阅片分别记录。

1.2.2.3 结果判定：阳性染色标准：Syn、CgA均以细胞膜/细胞浆弥漫有蓝色或深蓝色颗粒。400倍显微镜下随机选取5个视野，每个视野计数100个癌细胞，按染色程度与染色细胞比例分别计分进行综合评价。染色情况评分：基本不着色，0分；浅蓝色，1分，较明显蓝色，2分；深蓝色，3分。染色细胞比例评分：阳性染色细胞比例在5%及以下，0分；阳性染色细胞比例为6%～25%，1分；阳性染色细胞比例为26%～50%，2分；阳性染色细胞比例在51%～75%为3分，阳性染色细胞比例在75%以上为4分。将每个视野染色程度与染色细胞比例评分相乘，并求单个视野评分，再按以下标准评价表达情况：1分，为阴性(-)；2～3分，弱阳性(+)；4～7分，阳性(++)；8分及以上，强阳性(+++)。

1.3 统计学方法采用SPSS19.0软件处理研究数据，计数资料采用例和百分率进行描述，组间比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 SCLC与NSCLC的CT征象分析SCLC组胸腔积液(图1)、纵膈淋巴结融合(图2)等CT征像等出现比例明显高于NSCLC组(P＜0.05)，而阻塞征象、支气管截断征(图3)出现比例明显低于NSCLC组(P＜0.05)。而两组心包积液、胸膜转移等其他CT征象出现比例无统计学差异(P＞0.05)。见表1。

2.2 Syn、CgA在SCLC、NSCLC中表达Syn、CgA在SCLC中阳性表达率分别为86.67%(39/45)、53.33%(24/45)，在NSCLC中阳性表达率分别为16.00%(8/50)、4.00%(2/50)，Syn、CgA在SCLC中阳性表达率均明显高于它们在NSCLC中阳性表达率(χ2=47.315、28.998,P＜0.05)。

2.3 CT与Syn联合应用对SCLC的诊断价值在肺癌诊断中，与单一CT、Syn检查或CgA比较，二者联合明显提高对SCLC诊断的敏感度、特异度、准确度(P＜0.05)。见表2。

3 讨 论

多层螺旋CT由于扫描速度快、检查时间短、范围广泛及后处理功能强大，已成为肺癌最常用的影像手段。其能够清晰呈现病灶形态、大小、部位、密度、强化程度等特点，并能够显示由肺部肿块引起的支气管截断征、阻塞征象等，对肺癌有着重要诊断价值[5]。除肺癌自身形态学特征之外，应用薄层重组技术，CT还能够显示病灶与周围组织之间关系，尤其对胸膜、大血管、心包、纵隔及肺门淋巴结转移等征象的检出有着重要作用[6]。此外，通过广泛扫描还可观察、判断远处转移情况，并可综合病灶形态、密度、内部情况及周围侵犯等表现对病理分型作出一定判断[7]。本研究中95例肺癌CT图像可很好地显示肿瘤生物学特征，良好呈现了病灶各种征象和其周围组织结构关系，对肺癌诊断表现出巨大优势。肿瘤CT表现与其生物学特征密切相关。本研究显示，SCLC胸腔积液、纵膈淋巴结融合等CT征像出现比例明显高于NSCLC，而阻塞征象、支气管截断征出现比例明显低于NSCLC，这与相关报道[8]一致。NSCLC多起源于支气管上皮，肿瘤细胞倾向于朝气管腔内外生长，可致支气管截断、阻塞性改变。而SCLC是一种神经内分泌肿瘤，起源于支气管黏膜上皮细胞，肿瘤细胞倾向于朝官腔外生长，极少朝腔内生长，肿块生长方向与支气管长轴保持一致，气管通畅，虽亦可能出现阻塞征象、支气管截断征，但往往较晚。此外，SCLC恶性程度高，早期即出现转移，纵隔淋巴结相互融合而使组织分界不清[9]。因此，上述征象在鉴别SCLC与NSCLC上有一定帮助，当出现胸腔积液、纵膈淋巴结征象时应考虑SCLC的可能。

表1 SCLC与NSCLC的CT征象分析

表2 CT与Syn联合应用对SCLC的诊断价值

肿瘤标志物反映着肿瘤的生物学特性，对肺癌早期诊断有着重要意义。Syn是一种与突触功能有着紧密联系的膜蛋白，在脑、脊髓、视网膜等神经组织中均有分布[10]。CgA是一种由439个氨基酸组成的酸性可溶蛋白，多储存于神经内分泌细胞的致密核心颗粒中。作为经典的神经内分泌免疫标记物，两者常应用于神经内分泌肿瘤的诊断中[11]。SCLC有着明显的神经内分泌分化特征，亦属于神经内分泌肿瘤范畴，多种神经内分泌标记物在SCLC中有较高表达[12]。有报道显示，Syn在SCLC中阳性表达率为73%，CgA在在SCLC中阳性表达率为53%[13]。本研究结果显示，Syn、CgA在SCLC中阳性表达率分别为86.67%、53.33%，明显高于它们在NSCLC中阳性表达率(16.00%、4.00%)，这与既往报道[14]相符。这提示Syn、CgA在SCLC中表达有着较高特异性，对SCLC与NSCLC鉴别诊断有重要作用。CT是目前诊断肺癌的主要影像学手段，但其局限于形态学方面的分析，诊断效能不高，而联合肿瘤标记物检查，能够弥补其在肺癌诊断中定性困难的不足，提高鉴别诊断水平。本研究结果显示，CT联合Syn、CgA检查鉴别SCLC的敏感度、特异度、准确度分别为93.33%、94.00%、93.68%，均明显优于各单项检查。

综上所述，SCLC与NSCLC具有不同CT表现，且Syn、CgA表达差异显著；CT扫描联合Syn、CgA检查能够提高SCLC的鉴别诊断能力。