聂福贵，尹相吉，钱英红 ，郭少平，陈湘江，徐跃峰，杨晓野，王 瑞

（1.内蒙古农业大学兽医学院 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古 呼和浩特 010031；3.内蒙古阿拉善盟畜牧兽医工作站，内蒙古 阿拉善左旗 750306；4.山东省诸城市畜牧兽医管理局，山东 诸城 262200）

近年来，我国奶牛产业呈现稳定和持续发展的态势，奶牛存栏数逐年增加，奶牛养殖在畜牧业中的比重越来越大。内蒙古自治区作为我国最大的奶牛、绵羊及山羊放牧区和中国骆驼主要产区之一［1］，其地处欧亚大陆内部，面积 118.3 万 km2，资源储量丰富，素有“东林西矿、南农北牧”之称，草原面积约占高原面积的80%，属欧亚温带草原区的一部分，是我国四大牧场之一。近年来，为提高养殖业的整体水平，推动养殖业健康稳定的发展，进一步提高养殖的经济效益，在国家的号召下，全区各地都在从过去的散养模式积极向规模化、标准化的方向发展。

但是，随着养殖方式的转变，诸如饲养管理和疫病防治等问题也逐渐凸显，而寄生虫病一直以来都是影响养殖业发展的一个重要因素，困扰着广大养殖户。首先寄生虫可以消耗营养并导致机体抵抗力降低，易诱发其他疾病，降低了牛的养殖效益；其次由于药物防治不当还可能导致牛肉、牛奶及其制品的食品安全性问题；再就是人兽共患寄生虫病和多种动物共患寄生虫病，如牛常发的弓形虫病、隐孢子虫病、新孢子虫病、血吸虫病、肝片吸虫病和棘球蚴病等，严重威胁着人民群众的身体健康。由于寄生虫发病多呈隐性或慢性经过，加上牛本身的耐受力较其他动物强，尽管造成的损失很大，但不易被人察觉，因而常被忽视［2］。从目前对牛常见寄生虫调查数据来看，各地感染情况存在较大差异，因此，为了解内蒙古地区规模化牛场牛体寄生虫的感染情况，为今后治疗和预防本地区寄生虫病提供数据参考，笔者于2015—2017年，对内蒙古呼和浩特市和锡林郭勒盟的部分牛场进行寄生虫的流行病学调查。

表1 2015年规模化牛场牛感染寄生虫情况

1 材料与方法

1.1 样品采集

于2015—2017年间，共采集奶牛样品1 009份，包括粪样（主要用于线虫、球虫、绦虫、吸虫）、全血（主要用于检测血液原虫）、鼻拭子（主要用于肺丝虫检测）、阴道拭子（主要用于检测毛滴虫）。

1.2 试剂

饱和食盐水：将蒸馏水煮沸后，向其加入食盐直至饱和，倒入烧杯中放凉备用；生理盐水：称取9 g NaCl倒入三角瓶中，然后加入1 000mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌混匀，制成0.9%NaCl溶液；快速瑞姬氏染液试剂盒 （南京建成生物工程研究所）；牛新孢子虫抗体检测试剂盒（广州测迪生物科技有限公司）。

1.3 粪便样品的检查

1.3.1 饱和盐水漂浮法：称取粪样2 g，放入烧杯中，量取58 mL饱和食盐水倒入烧杯中，用镊子将粪样搅拌混匀，再用粪筛过滤至新的烧杯中，然后将滤液倒入事先准备好的小玻璃瓶中至有凸液面即可，漂浮20min，用盖玻片蘸取滤液，在显微镜下观察［3-5］。

1.3.2 离心沉淀法：称取5 g粪样，置于烧杯中，加25 mL清水，搅拌均匀。经粪筛过滤至10mL离心管中，置离心机上离心5 min（转速为1 000 r/min），然后倾去管内上层液体，再加9 mL清水，混匀，重复离心2次，直至上清液清亮为止，倒去部分上清液，留约为沉淀物1/2的液体量，用吸管抽吸混匀后，吸取粪液滴在载玻片上，加盖玻片后镜检［3-5］。

1.4 血液样品的检查

1.4.1 血涂片的检查：取一块干净的载玻片置于桌面上，将一滴全血滴在载玻片中央，然后取一块盖玻片与全血接触，待血蔓延开后，以45°角从右向左快速推动，将血液涂成舌状，然后采用瑞姬氏染液染色，在光学显微镜下观察血液中原虫的感染情况。

1.4.2 新孢子虫的检查：按照牛新孢子虫抗体检测试剂盒说明书的操作步骤进行，计算血清阳性率，并做分析。

1.5 鼻腔拭子和阴道拭子的检查

首先用棉拭子收集鼻腔和阴道表面的黏液，然后用一次性塑料吸管吸取生理盐水，反复冲洗棉拭子，将得到的液体倒入10mL离心管内，再放入离心机中离心5 min（1 500 r/min）。待离心完成后，弃上清，吸取沉淀于载玻片上进行镜检，观察是否有肺丝虫虫卵或毛滴虫等原虫。

1.6 虫卵计数

对粪便样品，采用麦克马斯特氏法计数每克粪便虫卵数（EPG）。首先按1.3的方法制备样品，然后用滴管将样品加到麦克马斯特计数板内，在显微镜下计数2个计数室内的全部虫卵，取平均值，再乘以 200，得到的结果即为 EPG［3-5］。

1.7 虫卵的鉴定

对检获的虫卵，依据虫卵的大小、形状、颜色、卵壳和内容物等特征，与标准图谱比较，鉴别虫卵的种类［6］。

2 结果与分析

2.1 2015年规模化奶牛场寄生虫感染情况

2015年共计调查了4个牛场333头奶牛，由表1可知，主要检出的寄生虫为线虫（主要为毛圆科线虫）和艾美耳球虫；就感染数量来看，球虫感染较线虫严重，其中以土左旗牛场（2）感染最多，有65例，感染率为65%，线虫感染率相较球虫低，且属带虫状态，另有肺丝虫1例。利用免疫学方法检测新孢子虫病，发现锡林郭勒盟牛场血清学阳性率可达71.9%；土左旗牛场（2）次之，为30%；土左旗牛场（1）较少，为 6%；呼市周边牛场（2）未检出。在4家牛场内均未检出吸虫、绦虫、血液原虫和毛滴虫。

表2 2016年规模化牛场牛感染寄生虫情况

表3 2017年规模化牛场牛感染寄生虫情况

表4 2015—2017年主要感染寄生虫对比

2.2 2016年规模化奶牛场寄生虫感染情况

2016年共计调查了4个牛场381头奶牛，由表2可知，4家牛场均未检出包括线虫、球虫、吸虫、肺丝虫、毛滴虫和血液原虫在内的任何寄生虫，感染率为0。

2.3 2017年规模化奶牛场寄生虫感染情况

2017年共计调查了4个牧场295头奶牛，由表3可知，主要感染的寄生虫为线虫与球虫，其中以球虫为主。在被调查的4个牧场中，呼市周边牛场（1）球虫感染率最高，为16.7%；土左旗牛场（2）的球虫感染强度最高，为100～2 900个/g。此外，4家牧场均未检出吸虫、绦虫、肺丝虫、毛滴虫和血液原虫。

2.4 2015—2017年主要寄生虫感染情况对比

图1 2015—2017年规模化牛场寄生虫感染率

由表4可知，在2015—2017年的3年时间内，内蒙古部分地区规模化牛场的寄生虫感染情况整体呈现下降的趋势。如图1所示，2015年线虫和球虫的总感染率为52.8%，2016年达最低为0，2017年相比2016年感染率有所上升，但总体上来看，依然呈下降趋势。

3 讨论

通过该次调查，对内蒙古呼和浩特市和锡林郭勒盟等地的规模化牛场3年间的寄生虫感染情况进行了深入的了解。由调查结果可知，感染的寄生虫主要为线虫、球虫和新孢子虫，个别牛场在鼻拭子中检出了肺丝虫，未有其他寄生虫（绦虫、吸虫、毛滴虫、血液原虫）检出，且寄生虫的总感染情况基本呈逐年下降的趋势，这表明养殖户在调查之前并未对寄生虫给予足够的重视，之后在调查的基础上，加强了对寄生虫的防治工作，相关预防和驱虫工作取得了很好的成效。

在调查的牛场中，以艾美耳球虫和毛圆科线虫感染最为普遍。牛球虫病是由艾美耳属的几种球虫寄生于牛肠道引起的，牛主要表现为急性肠炎、血痢等为特征的病症，多发生于犊牛［6］。牛线虫病是由线虫寄生于牛的消化道内引起的，主要表现明显的持续性腹泻、排出带黏液和血的粪便，幼畜发育受阻，进行性贫血，严重消瘦，甚至会伴有神经症状［7］。由于这两大类寄生虫独特的生活史和生物学特性，在各地均流行广泛，对养殖业造成了严重的危害，因此在生产实践中应给与足够重视。

除了前述两类虫体外，2015年还检出了新孢子虫，并且感染数量相对较多。奶牛新孢子虫病是由犬新孢子虫引起的一类多种家畜共患原虫病，其特征是奶牛体重和产奶量明显下降，造成孕畜流产、死胎、新生幼畜运动神经系统疾病，淘汰期提前，可造成严重的经济损失。一般认为，该病主要通过胎盘感染和经口传播［8］，如在欧洲和美国75%～95%的犊牛通过胎盘感染，而新西兰主要经口传播［9］。对于新孢子虫病的治疗，尚无特效药，国内对于奶牛新孢子虫病一直未给与足够的重视，这可能是导致所调查牛场新孢子虫感染率居高的原因。对于该病的防治，应在查明传染源的基础上，通过科学预防措施来进行控制。

此外，在调查的1 009份样品中未检出吸虫，主要原因是与当地的地理条件有关。呼和浩特市、呼和浩特市所属的土默特左旗及锡林郭勒盟属于山地平原地区，四季气候变化明显，日温差大，降雨量少，年均降雨量仅350mm，而吸虫的发育过程必须有中间宿主螺类，这些地区年降雨量很少，少有湖泊河流，因此螺类稀少，吸虫没有了中间宿主自然无法生存［10］。

针对以上的调查结果和基于调查结果的防控效果，为了更好地防控寄生虫的感染，笔者建议内蒙古地区的规模化牛场应该做到以下几点：①在线虫的防控中，整体防治效果较理想，线虫感染率也较低，但驱净率高低不同，因此，可在目前防治的基础上，调查剩余虫体是否具有耐药性，并与其他驱虫药交叉使用，提高驱虫效果并尽量避免耐药性现象的产生。②针对球虫病的防治上，应将犊牛与成年牛分群饲养，避免球虫卵囊污染犊牛的饲料；舍饲牛的粪便和圈舍需集中消毒，每周一次；做好药物驱虫工作，一年分2次进行。③对于新孢子虫病血清学阳性牛，应及时淘汰，并做好消毒和无害化处理，并加强牧场内犬的管理，不要让犬吃到流产胎儿、胎膜或死犊牛；规范奶牛场饲养管理，科学调配饲料，增强奶牛体质，提高奶牛抗病力；在引进牛只时，一定要进行检疫，避免将染有新孢子虫的病牛引入牛场［11］。