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牛磺鹅去氧胆酸对FLS细胞中GR介导的HSP 90基因表达的影响

2018-09-01宝力格郝大成朱相成罗宏亮李培锋

畜牧与饲料科学 2018年8期

宝力格 ,周 蕾 ,郝大成 ,朱相成 ,罗宏亮 ,3,李培锋

(1.内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古 呼和浩特 010018;2.农业部动物临床诊疗技术重点实验室,内蒙古 呼和浩特010018;3.内蒙古金宇保灵生物药品有限公司,内蒙古 呼和浩特 010030)

牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)是胆汁酸(bile acids,BAs)的主要活性成分之一,是一种结合型胆汁酸。其分子式为C23(OH)2H37CONHCH2CH2SO3H,主要存在于鸡、鸭、鹅、熊等动物胆汁中,在鸡胆汁中其含量最高[1-4]。

研究表明,TCDCA具有显著的抗炎免疫调节作用[1-4],其抗炎免疫调节作用与糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)介导的基因组学信号通路有关[5]。热休克蛋白 (heat shock proteins,HSPs)是生物体受到环境中物理、化学、生物、精神等因素刺激时发生应激反应而合成的高度保守的蛋白质[6]。 热休克蛋白 90(heat shock protein 90,HSP90)作为HSPs最重要的成员之一,表达于所有的真核细胞,但其在肿瘤细胞中的表达比相应的正常细胞高出2~10倍[7]。同时HSP90是GR必需的分子伴侣,承担了“分子开关”的作用。GR与HSP90和免疫亲和素(IP)结合成的复合物,以未活化型存在于细胞胞浆内,当机体受到刺激后,糖皮质激素进入靶细胞,与GR受体结合后,HSP90等与受体结合的蛋白质解离。为此,进一步探讨TCDCA激活GR受体后对HSP 90表达的调节作用,可深入揭示TCDCA抗炎免疫调节作用的分子机制。

1 材料与方法

1.1 试验材料

雄性SPF级SD大鼠,购自内蒙古医科大学实验动物管理中心。TCDCA,购自美国Sigma公司;弗氏完全佐剂,购自美国Sigma公司;DEME高糖液体培养基(Gibco);胎牛血清(Excell Bio);DPBS (Gibco);AXYGEN总RNA试剂盒 ;RT SuperMix;FastStart Universal SYBR Green Master(Rox)购于 Roche 公司;其他试剂均为国产或进口分析纯。

表1 TCDCA对FLS细胞中HSP90mRNA表达量的影响

1.2 研究内容与方法

1.2.1 成纤维样滑膜细胞的分离和培养:按照文献[5]中的方法建立AA模型。……

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