梁 乔，张 健 ，申贯男，王宏燕，关 淼，杨洺扬，李 蓉

（1.辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁 沈阳 110164；2.辽宁省动物医学研究院，辽宁 沈阳 110164）

猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）隶属圆环病毒科，在1974年被当作猪肾细胞中的一种污染物被发现，PCV1和PCV2是PCV的两种血清型，PCV1不具有致病性，在正常猪或养殖野猪身上均可存在，PCV2有致病性，是断奶仔猪多系统衰竭综合征（Post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）的原发病原[1-3]。自从PCV2在1998年被发现后，这种具有有限的编码能力的单链DNA病毒便被作为重要的猪流行病病原之一[4]，该病毒的长度是1.7 kb左右，严重的PCV2感染引起的典型特征是腹股沟淋巴结肿大。PCV2基因组中有一个高度保守的茎环结构，在单链DNA病毒中感染真核生物[5]。通过不同基因型的患病率调查显示，PCV2具有较高的变异性，目前已确定的是5种基因型从PCV2a-PCV2e，其中PCV2b和PCV2d是检出最多的两种基因型[6]。

本研究通过对2016年辽宁省14个市采集的1 580份屠宰场样本和2017年采集的1 850份屠宰场样本进行荧光定量PCR检测，分析PCV2在辽宁地区的流行情况，并对7株PCV2分离株进行全基因组扩增并通过测序进行生物信息学分析。

1 材料与方法

1.1 样品来源采集屠宰场猪组织样品，主要包括颌下淋巴结、肝脏、肺脏、脾脏、扁桃体等。

1.2 主要试剂病毒核酸提取试剂盒（磁珠法），购自苏州天隆生物科技有限公司；猪圆环病毒2型荧光PCR检测试剂盒（TaqMan探针法），购自中山大学达安基因股份有限公司。EX Taq DNA聚合酶（5 U/μL）、dNTP（2.5 mmol/L）、溴化乙锭、DL 2000 DNA Marker、三羟甲基氨基甲烷一乙酸电泳缓冲液购自宝生物工程（大连）有限公司。

1.3 病料DNA的提取

1.3.1 用无菌……