研制新型布鲁氏菌抗体胶体金快速检测卡方法的建立与应用
2018-08-25魏园园
魏园园
(辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164)
布鲁氏菌病(Brucellosis)是世界范围内非常重要的人畜共患病之一,属自然疫源性疾病。布鲁氏菌(Brucella)是布鲁氏菌病的病原菌,在自然条件下可长期潜伏存在[1],在我国被列为二类动物疫病。国内的布鲁氏菌检测通常采用推断性诊断方法是虎红平板凝集试验(Rose bengal test,RBPT)和试管凝集试验(Slide agglutination test,SAT),但由于检测时间、血清样品用量大以及阳性检出率低等方面限制,使这两种方法具有一定的局限性[2-3]。酶联免疫 方 法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)一直是布鲁氏菌快速检测的推荐方法之一,很多学者对其在布鲁氏菌的酶联免疫检测方法上进行了优化[4]和评价[5]。刘佳等[6]通过对比试验证明ELISA抗体检测优于RBPT、SAT检测方法。除此之外,PCR检测方法也是布鲁氏菌的检测方法之一[7]。
1971年Holgate等[8]将胶体金方法引入了免疫学领域,此后胶体金免疫技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学的各领域得到了日益广泛的应用[9]。目前,在医学检验中的应用主要是免疫层析法(immunochromatography assay)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay,DIGFA),用于检测HBsAg、HCG和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。胶体金免疫检测在布病检测中也相继进行了研发。通过对比其与金标免疫渗滤法和试管凝集试验,得出结论胶体金免疫方法具有试剂灵敏度和特异性,且其很小的血清用量(10 μL)更适用于临床应用[10]。由于胶体金技术优良的稳定性、灵敏度、精确度及制造过程中的可重复性,被广泛地应用在酶联免疫快速检测卡的生产上[11],适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等。……
