刘玉璞，国海东，邵水金

（上海中医药大学基础医学院人体解剖教研室，上海201203）

施万细胞（Schwann cell，SC）是一种存在于周围神经系统中的神经胶质细胞，参与形成髓鞘，并对周围神经起到保护、促进轴突再生及再生轴突的髓鞘化等作用[1]。SC分泌多种神经营养因子和神经生长因子，参与周围神经损伤后的修复，因此被广泛研究[2]。

细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞以研究导入基因功能和机制的方法[2,3]。目前转染细胞常用方法主要为非病毒载体法和病毒载体法，前者操作简单，广为应用；后者则有安全性欠佳和步骤繁琐等缺点[4]。非病毒载体法所使用的转染试剂主要是脂质体，其中常用的脂质体Lipofectamine 2000对许多细胞都具有较好的转染效率[5,6]。

转染试剂对细胞的转染效率可能存在差异，如Lipofectamine 2000转染库普弗细胞则效率欠佳[7]。SC的转染效率较低，鲜见能够高效转染SC的转染试剂，这给科研人员造成了较大的障碍[8]。因此，本实验培养大鼠SC株（RSC96），利用几种常见的广泛应用的转染试剂转染绿色荧光标记物FAM，比较以找到效率最高的转染试剂，并对其进行细胞毒性的观察，以寻找到最理想的转染试剂。

材料与方法

1 实验材料

大鼠RSC96购自上海中科院细胞研究所，lipofectamine 2000购自invitrogen公司，FuGENE6 Transfection Reagent购自Promega公司，SuperFectin II reagent购自上海普飞生物技术有限公司，羧基荧光素（FAM）标记的microRNA（miRNA）阴性对照由上海吉玛制药技术有限公司合成，高糖DMEM培养基、胎牛血清（FBS）和PBS均购自美国CORNINIG公司，CCK-8试剂盒购自碧云天生物技术有限公司，TUNEL凋亡试剂盒购自上海翊圣生物科技有限公司。……