任德伟，钟锦 ，杨敬

（重庆市中医院肾内科，重庆40000）

肾纤维化是各种慢性肾脏疾病进展到终末期肾病的共同途径，是由多种细胞因子介导、多信号通路参与的病理过程，以细胞外基质成分过度沉积和肾间质成纤维细胞增生导致的肾脏结构破坏、功能丧失为特征[1]。微小RNA（microRNA, miRNA）是一类短链小分子非编码RNA，广泛参与肾脏的生理和病理过程[2]。miR-200c是miR-200家族重要成员之一，其位于染色体12p13.31上，较多的研究发现，器官纤维化时miR-200c表达明显下调，如miR-200c在肺[3]、腹膜[4]、皮肤[5]等器官纤维化时表达均明显降低，但至今有关miR-200c与肾脏纤维化关系的研究甚少，并且作用机制尚不清楚。TGF-β/Smad信号通路与脏器纤维化的关系密切，TGF-β1和Smad3是TGF-β/Smad信号通路最重要的调控因子，在脏器纤维化中起促进作用[6,7]。研究证实miR-200c可以调控TGF-β1/Smad3信号通路参与机体生理和病理过程[8]。单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstmction,UUO）可以导致实验动物模型出现肾纤维化，是目前研究肾纤维化最常用的方法[9]。本研究通过建立UUO肾间质纤维化小鼠模型，观察miR-200c在UUO小鼠肾组织中的表达变化及其对UUO小鼠肾间质纤维化和TGF-β1/Smad3通路的影响。

材料与方法

1 实验动物

健康雄性SPF级C57BL/6J小鼠45只，体重21～26g，购自重庆医科大学动物实验中心。于室温安静环境下常规饲养，昼夜交替，自由饮食饮水，适应环境1w。本研究中所有动物的实验操作均符合动物伦理学标准。

2 药物与试剂

Scr和BUN 测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；TRIzol试剂购自美国Invitrogen公司；Allin-OneTMmiRNA First-Strand cDNA Synthesis Kit和All-in-OneTMmiRNA qPCR Kit购自广州复能基因有限公司；agomir-200c、miR-200c和U6引物购自上海生工生物工程公司；……