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血IGRAs在结核性脑膜炎早期诊断中的临床应用

2018-08-21廖伟祥

中国医药指南 2018年19期
关键词:方法

廖伟祥

(广州市胸科医院,广东 广州 510180)

结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)是由结核分枝杆菌所导致的脑膜非化脓细菌性炎性病变,有些患者并没有出现肺结核的症状。现今,辅助检查结核性脑膜炎,灵敏度和特异度不高。而结核性脑膜炎是一种重症结核,病死率高,出现后遗症的概率极高[1]。所以早期快速准确诊断结核性脑膜炎对于结核性脑膜炎患者的治疗及预后尤为关键。本文对研究血IGRAs在结核性脑膜炎早期诊断中的应用价值进行了探讨。

1 资料与方法

1.1 研究对象:TBM组45例,所有患者均未进行抗结核治疗;男性25例,女性20例,年龄13~68岁,依据临床症状、脑脊液生化和常规、细菌学、结核抗体、结核杆菌PCR检查、抗结核治疗有效而确诊。对照组49例,根据其出院诊断排除结核病的患者;男性32例,女性17例,年龄17~81岁。

1.2 方法:全部试验对象都在进行治疗之前,进行外周血抽取,并且血量是4 mL,之后行IGRAs和ATA阳性率检测。

1.2.1 血IGRAs是运用采购至英国Oxford企业的T-SPOT.TB试剂盒,基于试剂说明书及本科室SOP文件进行操作。运用4 mL外周静脉血注到真空肝素锂抗凝管中,并且马上进行混匀的操作,在4 h内进行外周血单个核细胞(PBMC)的分离操作,并且借助AIM培养液,将其调节到250万PBMC/mL,再倾倒至T-SPOT.TB试剂盒微孔板内,每例标本应该配备4个微孔板,并且添加AIM(空白)、阳性对照、抗原A(ESAT-6)及抗原B(CFP-10)。最后于5%CO:培养箱中培养16~20 h。第2天,将微孔板拿出,脱去PBS,添加碱性磷酸酶标记的抗1干扰素,在4 ℃的环境下进行培养,培养时间是2 h,再次脱去PBS,显色,晾干。计算每孔中斑点数量,结果判定:当阴性对照斑点数<6,A或B抗原孔与其所得差≥6即为阳性;……

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