王文涛，李天柱，杨 霄

（1.赤峰学院 医学院；2.赤峰制药股份有限公司，内蒙古 赤峰 024000）

临床微生物学检验是一门以实验技术为支撑的学科，动物实验是其中重要的一类实验.肺炎链球菌简称肺炎球菌，在自然界中分布广泛，可以在5－10%的健康成人及20－40%儿童的鼻咽内发现，在某一些环境，尤其是一些经常与人接触的地方（如医院或军营），可以发现更多的数量.多数不致病或致病力很弱，少数致病力较强，其能否致病与荚膜有密切关系，因荚膜能抵抗人体内吞噬细胞的吞噬作用而致细菌大量繁殖，是细菌性大叶性肺炎的主要病原体.肺炎球菌荚膜在小白鼠体内毒力实验是重要的动物实验之一，其实验过程是很复杂的，在实验过程中遇到一些问题，并总结了一些经验.

1 培养基制备

1.1 液体培养基的制备

以无菌方式加无菌脱纤维羊血5ml于高压灭菌后冷却到50℃的营肉汤培养基100ml中，混匀后分装灭菌试管每支3ml左右，置35℃温箱中过夜，证明无菌后使用.因此菌营养要求高，所以加血的量可多一些.

1.2 固体培养基的制备

将血琼脂基础培养基溶于蒸馏水中，68.95Kpa高压灭菌15min,冷却50℃时加入5-10%脱纤维羊血混匀，倾注无菌平板，备用.此培养基的制备过程一定要注意无菌操作.

2 菌种准备

2.1 菌种的筛选

菌种要选用肺炎链球菌标准菌株，其编号为CMCC31001.因标准菌株有典型生物学特性，这对此实验的结果是非常重要的.

2.2 菌种的接种与传代

肺炎链球菌标准菌株为真空冻干粉，取出后恢复……