极小种群野生植物金线莲种质创制与快繁利用
2018-08-03罗桂芬郝代成
罗桂芬 郝代成
[摘 要]金线莲为兰科开唇兰属多年生草本珍稀中草药。采用野生金线莲的种子,无菌萌发后,进行种质创制,6-BA浓度对诱导变异植株影响较大;在MS+6-BA0.3+NAA0.5培养基中快繁效果较好;在MS+NAA1.0培养基中,根系发达,植株健壮,生根率达100%。
[关键词]野生植物 金线莲 种质创制 快繁
中图分类号:TU198 文献标识码:A 文章编号:1009-914X(2018)28-0235-01
1.植物名称
金线莲(Anoectochilus roxburghii.)
2. 材料类别
野生金线莲,种子,来源于文山麻栗坡。无菌萌发后,选叶片上金线明显单株的顶芽和侧芽作为繁殖材料。
3. 培养条件
基本培养基为MS:(1)种子萌发培养基:无激素1/2MS+2%S;(2)侧芽诱导与培养基:S1: MS+无激素; S2: MS+BA0.5mg·L-1(单位下同)+ NAA0.1;S 3: MS+BA1.0+ NAA0.1;S 4: MS+BA2.0+ NAA0.1;S 5: MS+BA5.0+ NAA0.1;蔗糖均为3%。(3)增殖培养基:MS+BA0.3 +NAA0.5 +3%S+香蕉0.1%;(4)生根培养基:MS+NAA0.5 +3%S+香蕉0.1% 。以上培养基含琼脂5g·L-1,PH5.8。温度为25±1℃,光照时间8h.d-1,光照强度1000lx。
4. 生长与分化
4.1材料与消毒
选柔软的牙刷,用肥皂水刷洗未开裂的金线莲新鲜果实表皮,自来水清洗后,在操净台上用无菌水冲洗2-3次,用1‰的升汞(氯化汞)泡15-20分钟。用无菌水冲洗3-5次,最后在无菌的培养皿中切开果实,把种子均匀播种于培养基(1)中,置于室内温度在(25±1)℃的条件下培养。20d后,种子开始萌发,50d后顶芽和腋芽长高约3-5cm,无丛芽产生。
4.2 顶芽和腋芽的诱导
将萌发的种子苗,切成带一个腋芽或顶芽的茎段,按一株一个体系编号,转接于培养基(2)-中,经过45-60d的培养,茎段上原有的顶芽或侧芽生长较快,约4-5cm,带6-8个侧芽,在原茎段的基部诱导出1-2个细弱的丛芽。
4.3 金线莲种质创制
在金线莲诱导丛芽过程中,发现植株叶片颜色、金线网纹、茎秆颜色等有变异产生,实验结果显示,6-BA浓度对诱导变异植株影响较大。……