陈 樨 福州大北农生物技术有限公司 福州 350014

随着市场对兽用疫苗的质量和数量要求的不断提高，疫苗生产技术也正经历着一场具有重大意义的技术变革，即由传统的转瓶生产疫苗技术向大规模高效的反应器生产疫苗的发展[1]。近年来，激流式生物反应器培养技术已广泛应用于兽用疫苗的研究与生产中[2]。该技术通过优化培养工艺与条件，高密度培养细胞，以达到提升抗原含量的目的，已经取得了显著的效果。其应用既能降低生产成本，又能提高产品质量。

目前传统猪瘟细胞苗生产仍是以转瓶生产工艺为主，提高病毒增殖滴度是目前疫苗生产的重要环节，而大规模生物反应器的生产技术为细胞苗的生产带来新的思路[3]。本试验旨在采用激流式生物反应器培养技术，培养高效价的猪瘟ST细胞抗原。通过两次反应器试验，初步建立了应用反应器培养ST细胞及增殖猪瘟病毒的方法。

1 材料与方法

1.1 主要试验材料

1.1.1 大兔脾毒 批号20121028，代次F5，脾毒效价为10万RID/g，由公司脾淋苗组提供。

1.1.2 ST细胞 由北京大北农疫苗产业科技研究院提供。

1.1.3 试验动物 营养良好，体重2.5～3 kg家兔，由福建省连江玉华山自然生态农业试验场提供。

1.1.4 主要试剂 新生牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司；DMEM高糖型、胰酶购自GIBCO公司。

1.1.5 主要设备与仪器 AP20-II激流式生物反应器购自杭州安普生物工程有限公司；UV-1200紫外分光光度计购自上海美谱达仪器有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 ST细胞复苏与扩繁 采用常规方法复苏ST细胞，细胞按1：5比例扩繁出10个10 L转瓶，其中8个转瓶用于反应器培养，2个转瓶作为对照组，按转瓶的生产工艺培养。……