蒋正财，陈统

温州医科大学附属第二医院肿瘤外科，浙江 温州 325000

结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是我国常见恶性肿瘤之一，2015年我国CRC患病人数男性新增21.57万，女性新增16.06万，死亡人数男性为11.11万，女性为8万[1]。近年来，抗血管治疗无论在基础研究还是临床应用中都取得了一定的成果，如贝伐单抗是美国食品药品管理局批准的一线治疗CRC的重组人源化单克隆抗体，但靶向肿瘤血管药物却存在价格昂贵、容易出现不良反应及耐药等缺点，而我国传统医药治疗肿瘤具有多靶点的特点，以及价格低廉、毒副作用小的优势，可弥补此方面的缺陷。本课题组前期实验结果表明枸杞多糖(LBP)可抑制肝癌模型小鼠血管内皮生长皮子(VEGF)的表达[2]，LBP是否具有抑制CRC肿瘤血管形成的作用，其具体作用机制需要进一步探讨。

1 材料与方法

1.1 实验动物与细胞 6～8周SPF级SD大鼠2只，雌性，体质量(200±20)g，由南方医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2016-0041。6～8周SPF级Balb/c小鼠16只，雄性，体质量(20±2)g，由南方医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2016-0041，实验动物饲养于室温20～26℃、相对湿度40%～70%的环境中，昼夜明暗光照时间(12 h明/12 h暗)。小鼠CRC结直肠癌细胞株(CT26)细胞和人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)由温州医科大学附属第二医院实验室保种。

1.2 药物、试剂与仪器 LBP(质量分数为60%，生产批号：K140828)购于中国西安开来生物工程有限公司，CD31抗体购于Abcam公司，免疫组化抗兔二抗购于中国北京中杉金桥生物技术公司；PCR引物由中国英潍捷基公司合成，DAB购于美国CST公司；matrigel购于美国BD公司，SYBR Green Mix和逆转录试剂盒购于Takara公司。……